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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321233 | 植物可溶性糖含量測試盒(比色法) | 100管/96樣 |
AS6321233 | 植物可溶性糖含量測試盒(比色法) | 50管/48樣 |
測定意義:
糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)??扇苄蕴鞘侵笜悠分械倪€原單糖及在本法測定條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉。
測定原理:
蒽酮比色法??捎糜诳扇苄詥翁恰⒐烟呛投嗵堑暮繙y定,具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優(yōu)點。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、沸水浴、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、濃硫酸(不允許快遞)研缽、和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:粉劑×1瓶,4℃避光保存;
試劑二:10mL×1瓶 ,4℃保存;
樣品中可溶性糖的提?。?/p>
稱取0.1~0.2g樣本,加入1mL蒸餾水研磨成勻漿,倒入有蓋離心管中,95℃水浴10min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清液于10ml試管中,用蒸餾水定容至10mL,搖勻備用。
測定步驟
1、分光光度計或酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至620nm,蒸餾水調(diào)零。
2、調(diào)節(jié)水浴鍋至95度。
3、工作液的配制:在試劑一中加入2.5mL試劑二。充分溶解后使用,如較難溶解,可加熱攪拌;用不完的試劑4℃保存一周;
4、加樣表(在EP管中反應(yīng)):
試劑(μL) | 空白管 | 測定管 |
樣本 | 40 | |
蒸餾水 | 80 | 40 |
工作液 | 20 | 20 |
濃硫酸 | 200 | 200 |
混勻,置95度水浴中10min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻至室溫后,取200 uL轉(zhuǎn)移至微量石英比色皿或96孔板中,于620nm處,分別讀取空白管和測定管吸光值,ΔA=A測定管-A空白管。
注意:1、空白管只要做一管。
2、如果ΔA大于1,需要將樣本用蒸餾水稀釋,計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
3、由于濃硫酸具有強腐蝕性,請謹慎操作。
可溶性糖含量計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、標準條件下測定的回歸方程為y = 8.55x - 0.07;x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、按樣本鮮重計算:
可溶性糖(mg /g鮮重)= [(ΔA+0.07) ÷8.55×V1]÷(W×V1÷V2)=1.17×(ΔA+0.07) ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計算:
可溶性糖(mg /mg prot)=[ (ΔA+0.07) ÷8.55×V1]÷(V1×Cpr)=0.117×(ΔA+0.07) ÷Cpr。
V1:加入樣本體積,0.04mL;V2:加入提取液體積,10mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。
b.用96孔板測定的計算公式如下
1、標準條件下測定的回歸方程為y = 4.275x - 0.07;x為標準品濃度(mg/mL),y為吸光值。
2、按樣本鮮重計算:
可溶性糖(mg /g鮮重)= [(ΔA+0.07) ÷4.275×V1]÷(W×V1÷V2)=2.34×(ΔA+0.07) ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計算:
可溶性糖(mg /mg prot)= [(ΔA+0.07) ÷4.275×V1]÷(V1×Cpr)=0.234×(ΔA+0.07) ÷Cpr。
V1:加入樣本體積,0.04mL;V2:加入提取液體積,10mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。
注意:檢測限為1mg/g鮮重或10ng/ mg prot
公司正在出售的產(chǎn)品:
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