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大鼠肝星形細(xì)胞

參考價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱智立中特(武漢)生物科技有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號CFSC-8B
  • 所  在  地武漢市
  • 廠商性質(zhì)
  • 更新時(shí)間2022/6/23 17:05:37
  • 訪問次數(shù)499
產(chǎn)品標(biāo)簽:

星形細(xì)胞大鼠肝星形細(xì)胞

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微生物菌種,細(xì)胞株,培養(yǎng)基
產(chǎn)地 國產(chǎn) 級別 其他
大鼠肝星形細(xì)胞
細(xì)胞名稱:大鼠肝星形細(xì)胞

  平臺編號:zl-057020

  規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

  細(xì)胞信息:CFSC-8B

  該細(xì)胞于原代末期凍存。

  細(xì)胞特性

  1)來源:大鼠肝臟

  2)形態(tài):貼壁生長
大鼠肝星形細(xì)胞 產(chǎn)品信息

  一、細(xì)胞簡介:


  細(xì)胞名稱:大鼠肝星形細(xì)胞


  平臺編號:zl-057020


  規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶


  細(xì)胞信息:CFSC-8B


  該細(xì)胞于原代末期凍存。


  細(xì)胞特性


  1)來源:大鼠肝臟


  2)形態(tài):貼壁生長


  3)含量:>1x106個(gè)/mL


  4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性


  5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝


  二、細(xì)胞培養(yǎng)步驟


  培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:


  1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗1%。


  2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。


  3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。


  三.細(xì)胞處理:


  1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。


  2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


  對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:


  1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。


  2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。


  3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。


  4.收到細(xì)胞后傳代推薦將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。


  細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。


  四、運(yùn)輸和保存


  可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式


 ?。?)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;


 ?。?)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。


 ?。?)收到細(xì)胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。


  細(xì)胞用途:僅供科研使用。


  五、細(xì)胞接收后的處理:


  1)收到細(xì)胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。


  2)在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時(shí),在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請?jiān)?0X和20×物鏡下,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。


  3)觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。


  4)貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會(huì)有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。


  5)懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。


  6)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后傳代建議1:2傳代。


關(guān)鍵詞:顯微鏡
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