單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導”
(3)分離和純化抗原分子。單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關,骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘?,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化。
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英文名稱Anti-ADCK1科研
中文名稱 ADCK1蛋白抗體
別 名 aarF domain containing kinase 1; ADCK 1; BOS_11212; FLJ39600; MGC142877; Uncharacterized aarF domain containing protein kinase 1; 2610005A10Rik; ADCK1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 細胞生物 免疫學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 59kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ADCK1
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
單抗原理:
抗體主要由B淋巴細胞合成。每個B淋巴細胞有合成一種抗體的遺傳基因。動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系,含遺傳基因不同的B淋巴細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成多克隆,并合成多種抗體。如果能選出一個一種專一抗體的細胞進行培養(yǎng),就可得到由單細胞經(jīng)分裂增殖而形成細胞群,即單克隆。單克隆細胞將合成一種決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。
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phospho-SYT1(Ser309) 磷化突觸結合蛋白1抗體 50次Semen euryales芡實PCR鑒定試劑盒 負20度 一年2-4周 低溫
人血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒維拉帕米相關物質(zhì)E標準品
S100A11鈣結合蛋白檢測試劑盒Crocin*靛藍胭脂紅標準品靛藍胭脂紅標準品48T/96T細胞株1x10^6cells
Anti-ADCK1科研SNX27 SNX27蛋白抗體進口/國產(chǎn)豬鐵血紅蛋白(MHB)ELISA Kit,48T/96T
TRPV4/TRP12 瞬時受體電位蛋白12抗體進口/原裝人凝膠原蛋白(gelson)ELISA Kit,48T/96T
CD34分子檢測試劑盒對照品進口/原裝鹽地爾硫卓標準品鹽地爾硫卓標準品48T/96TCyclin ⅠAuroraKinaseA
腫瘤干細胞標記物檢測試劑盒對照品進口/分裝基麥芽酚標準品基麥芽酚標準品48T/96TAURKACellDivisionCycleProtein20
TH/T-H glycoprotein TH糖蛋白抗體進口/分裝人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA Kit,48T/96T
Parkin蛋白檢測試劑盒對照品*維生素E 琥珀酯標準品維生素E 琥珀酯標準品48T/96TCdc20CyclinB1
UHRF1 核蛋白95抗體*小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA Kit,48T/96T
維生素B檢測試劑盒對照品進口/國產(chǎn)達卡標準品達卡標準品48T/96TCyclin B1CellDivisionCycleProtein2
單抗制備過程:
1.提取合成專一性抗體的單個B淋巴細胞(不能在體外生長)。
2.應用細胞雜交技術使骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合,得到雜交瘤細胞。
3.對雜交瘤細胞進行細胞培養(yǎng),選出所需要的細胞群,并進行克隆化培養(yǎng),得到穩(wěn)定的雜交瘤細胞,再進行大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。
4.提純,一般常用金黃色葡萄球菌蛋白A-瓊脂糖4B親和層析法。
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化