單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng),靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)”
(3)分離和純化抗原分子。單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化。
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英文名稱Anti-BZW2說明書
中文名稱 BZW2蛋白抗體
別 名 HSPC028; MSTP017 antibody Basic leucine zipper and W2 domain containing protein 2; Basic leucine zipper and W2 domains 2; BZW 2; MST017; BZW2_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞分化
蛋白分子量 predicted molecular weight: 48kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from hu BZW2
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
單抗原理:
抗體主要由B淋巴細(xì)胞合成。每個B淋巴細(xì)胞有合成一種抗體的遺傳基因。動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細(xì)胞系,含遺傳基因不同的B淋巴細(xì)胞合成不同的抗體。當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時,抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細(xì)胞。被激活的B細(xì)胞分裂增殖形成多克隆,并合成多種抗體。如果能選出一個一種專一抗體的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),就可得到由單細(xì)胞經(jīng)分裂增殖而形成細(xì)胞群,即單克隆。單克隆細(xì)胞將合成一種決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。
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TCF3/E2A/E47 轉(zhuǎn)錄因子3抗體(螺旋螺旋蛋白HE47) 50次Fructus aristolochiae馬兜鈴染料法PCR鑒定試劑盒 負(fù)20度 一年2-4周 低溫
人參皂苷Rh2Ginsenoside Rh296T/48T
蛋白Z檢測試劑盒對照品進(jìn)口/分裝水楊標(biāo)準(zhǔn)品水楊標(biāo)準(zhǔn)品48T/96T細(xì)胞株1x10^6cells
Anti-BZW2說明書ALG11 天門冬酰胺連接糖基化11抗體進(jìn)口/國產(chǎn)大鼠游離三狀腺原氨(Free-T3)ELISA Kit,48T/96T
ALS2CR4 肌縮側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體進(jìn)口/原裝人游離狀腺素(FT4)ELISA Kit,48T/96T
核糖核酶L檢測試劑盒SPS瓊脂SPS瓊脂48T/96TINSInsulin-likegrowthfactor2
醛血清白蛋白結(jié)合物檢測試劑盒改良MC菌瓊脂培養(yǎng)基改良MC菌瓊脂培養(yǎng)基48T/96TIGF-2Glucagon
AMIGO3 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體進(jìn)口/分裝小鼠游離狀腺素(FT4)ELISA Kit,48T/96T
內(nèi)皮素受體A檢測試劑盒MRS瓊脂MRS瓊脂48T/96TGCacetylcholine
AMN1 細(xì)胞核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體*大鼠游離狀腺素(FT4)ELISA Kit,48T/96T
內(nèi)皮素受體B檢測試劑盒改良MRS瓊脂培養(yǎng)基改良MRS瓊脂培養(yǎng)基48T/96TACHFreecholesterol
單抗制備過程:
1.提取合成專一性抗體的單個B淋巴細(xì)胞(不能在體外生長)。
2.應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。
3.對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),選出所需要的細(xì)胞群,并進(jìn)行克隆化培養(yǎng),得到穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。
4.提純,一般常用金黃色葡萄球菌蛋白A-瓊脂糖4B親和層析法。
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化