單克隆抗體:
1.概念:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
2.特點(diǎn):化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng),靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)”
(3)分離和純化抗原分子。單抗的制備過(guò)程:
1.動(dòng)物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化。
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英文名稱Anti-CCDC94價(jià)格
中文名稱 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白94抗體
別 名 Coiled coil domain containing protein 94; FLJ10374; MGC156684; CCD94_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 37kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CCDC94
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
單抗原理:
抗體主要由B淋巴細(xì)胞合成。每個(gè)B淋巴細(xì)胞有合成一種抗體的遺傳基因。動(dòng)物脾臟有上百萬(wàn)種不同的B淋巴細(xì)胞系,含遺傳基因不同的B淋巴細(xì)胞合成不同的抗體。當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時(shí),抗原分子上的許多決定簇分別激活各個(gè)具有不同基因的B細(xì)胞。被激活的B細(xì)胞分裂增殖形成多克隆,并合成多種抗體。如果能選出一個(gè)一種專一抗體的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),就可得到由單細(xì)胞經(jīng)分裂增殖而形成細(xì)胞群,即單克隆。單克隆細(xì)胞將合成一種決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。
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Collagenase I ELISA Kit 大鼠膠原酶I規(guī)格:15mg重組人 EPOR / Erythropoietin Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Hp-IgG(Mouse Helicobacter pylori IgG) ELISA Kit 小鼠幽門(mén)螺旋菌IgG規(guī)格:25mg重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL-3(Human Interleukin 3) ELISA KIT 人白介素3規(guī)格:200mg重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 ?牦浯??張硤樭慩杮楸礭湩瑧湡?挭撿敨木戨楡桳湡)
Anti-CCDC94價(jià)格酸二聚松柏酯HPLC≥99%ELISA Kit for Nucleoporin 88kDa (NUP88)
酸六棱菊亭酯HPLC≥98%ELISA Kit for Sperm Specific Antigen 2 (SSFA2)
酸維生素EHPLC≥98%ELISA Kit for Contactin 1 (CNTN1)
酰胺HPLC≥98%ELISA Kit for Protein Kinase C Zeta (PKCz)
?;惏叵┧酘PLC≥98%ELISA Kit for Macro Creatine Kinase (MCK)
酰三尖杉HPLC≥95%ELISA Kit for Activating Transcription Factor 4 (ATF4)
異補(bǔ)骨脂色烯查耳HPLC≥98%ELISA Kit for Von Willebrand Factor (vWF)
異長(zhǎng)春花苷內(nèi)酰胺HPLC≥98%ELISA Kit for Superoxide Dismutase 1, Soluble (SOD1)
單抗制備過(guò)程:
1.提取合成專一性抗體的單個(gè)B淋巴細(xì)胞(不能在體外生長(zhǎng))。
2.應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。
3.對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),選出所需要的細(xì)胞群,并進(jìn)行克隆化培養(yǎng),得到穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。
4.提純,一般常用金黃色葡萄球菌蛋白A-瓊脂糖4B親和層析法。
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化