單克隆抗體:
1.概念:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
2.特點(diǎn):化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng),靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)”
(3)分離和純化抗原分子。單抗的制備過程:
1.動(dòng)物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘?,將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化。
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英文名稱Anti-CYB5R3科研
中文名稱 細(xì)胞色素b5還原酶3抗體
別 名 B5R; Cyb5r3; Cytochrome b5 reductase 3; Cytochrome b5 reductase; DIA1; Diaphorase 1; Diaphorase-1; NADH cytochrome b5 reductase 3; NADH-cytochrome b5 reductase 3 membrane-bound form; NADH-cytochrome b5 reductase 3 soluble form; NB5R3_HUMAN; OTTHUMP00000028761; OTTHUMP00000198435; OTTHUMP00000198574; OTTHUMP00000198662; OTTHUMP00000198665.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 脂蛋白 新陳代謝
蛋白分子量 predicted molecular weight: 34kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CYB5R3
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
單抗原理:
抗體主要由B淋巴細(xì)胞合成。每個(gè)B淋巴細(xì)胞有合成一種抗體的遺傳基因。動(dòng)物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細(xì)胞系,含遺傳基因不同的B淋巴細(xì)胞合成不同的抗體。當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時(shí),抗原分子上的許多決定簇分別激活各個(gè)具有不同基因的B細(xì)胞。被激活的B細(xì)胞分裂增殖形成多克隆,并合成多種抗體。如果能選出一個(gè)一種專一抗體的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),就可得到由單細(xì)胞經(jīng)分裂增殖而形成細(xì)胞群,即單克隆。單克隆細(xì)胞將合成一種決定簇的抗體,稱為單克隆抗體。
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PRR11 富含脯氨蛋白11抗體 50次Bulbus lilii百合探針法PCR鑒定試劑盒 負(fù)20度 一年2-4周 低溫
青陽參甙元BSecoisolariciresinol Diglucoside96T/48T
谷氧還蛋白1檢測(cè)試劑盒對(duì)照品*己孕標(biāo)準(zhǔn)品己孕標(biāo)準(zhǔn)品48T/96T細(xì)胞株1x10^6cells
Anti-CYB5R3科研DL-組氨Anti-Gelsolin/FITC 熒光素標(biāo)記凝溶膠蛋白抗體IgG
DL-組氨鹽鹽Anti-Gentamicin/FITC 熒光素標(biāo)記慶大霉素抗體IgG
L-組氨鹽鹽Anti-GFAP/FITC 熒光素標(biāo)記膠質(zhì)纖維性蛋白抗體IgG
L-組氨鹽鹽一水物Anti-GFP/FITC 熒光素標(biāo)記綠色熒光蛋白抗體IgG
BOC-Nim-芐基-L-組氨Anti-GFP/FITC 熒光素標(biāo)記綠色熒光蛋白抗體IgG
L-絲氨酯鹽鹽Anti-GFP/FITC (Green Fluorecent protein) 熒光素標(biāo)記兔抗綠色熒光蛋白抗體IgG
D-絲氨Anti-human Fibrinogen/Biotin 生物素化兔抗人纖維蛋白原
DL-絲氨Anti-GFR Alpha-1/GDNF /FITC 熒光素標(biāo)記GDNF家族受體α-1抗體IgG
單抗制備過程:
1.提取合成專一性抗體的單個(gè)B淋巴細(xì)胞(不能在體外生長(zhǎng))。
2.應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。
3.對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),選出所需要的細(xì)胞群,并進(jìn)行克隆化培養(yǎng),得到穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。
4.提純,一般常用金黃色葡萄球菌蛋白A-瓊脂糖4B親和層析法。
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化