本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321222 | 可溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(SAI)測試盒(比色法) | 100管/48樣 |
AS6321222 | 可溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(SAI)測試盒(比色法) | 50管/24樣 |
測定意義:
蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH,Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。
AI的最適pH為3~5。AI分為可溶性AI(S-AI)和細胞壁不溶性AI(B-AI)兩種類型。S-AI主要存在于細胞液泡或自由空間中,最適 pH 為4.5~5.0(酸性),通過降解液泡中蔗糖,調(diào)節(jié)液泡中蔗糖的利用和果實內(nèi)糖類的積累。
測定原理:
S-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與S-AI活性成正比。
自備用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入10mL試劑一充分溶解備用;用不完的試劑4℃保存;
試劑三:液體15mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提?。?/p>
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。12000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定步驟和加樣表:
分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至510nm,蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測定,(在EP管中依次加入下列試劑):
試劑名稱(μL) | 測定管 | 對照管 |
樣本 | 50 | 50 |
試劑一 | 200 | |
試劑二 | 200 |
混勻, 37℃準確水浴30min后,95℃水浴10min(蓋緊,以防水分散失),流水冷卻后充分混勻(以保證濃度不變)
試劑三 | 125 | 125 |
混勻,95℃水浴10min(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中, 510nm處記錄各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸餾水稀釋后測定(計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)),ΔA=A測定-A對照。每個測定管需設一個對照管。
S-AI活性計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0016x -0.001;x為標準品濃度(μg/mL),y為吸光值。
(1)按蛋白濃度計算:
單位的定義:37℃每mg蛋白每分鐘產(chǎn)生1μg還原糖定義為一個酶活性單位。
S-AI活性(μg/min/mg prot)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V1]÷(V1×Cpr ) ÷T=20.8×(ΔA +0.001) ÷Cpr
(2)按鮮重計算:
單位的定義:37℃每g組織每分鐘產(chǎn)生1μg還原糖定義為一個酶活性單位。
S-AI活性(μg/min/g鮮重)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V1]÷(W×V1÷V2) ÷T=20.8×(ΔA +0.001) ÷W
V1:加入反應體系中樣本體積,0.05mL;V2:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,30min; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0008x -0.001;x為標準品濃度(μg/mL),y為吸光值。
(1)按蛋白濃度計算:
單位的定義:37℃每mg蛋白每分鐘產(chǎn)生1μg還原糖定義為一個酶活性單位。
S-AI活性(μg/min/mg prot)=[(ΔA +0.001) ÷0.0008×V1]÷(V1×Cpr ) ÷T=41.6×(ΔA +0.001) ÷Cpr
(2)按鮮重計算:
單位的定義:37℃每g組織每分鐘產(chǎn)生1μg還原糖定義為一個酶活性單位。
S-AI活性(μg/min/g鮮重)=[(ΔA +0.001) ÷0.0008×V1]÷(W ×V1÷V2)÷T=41.6×(ΔA +0.001) ÷W
V1:加入反應體系中樣本體積,0.05mL;V2:加入提取液體積,1mL;T:反應時間,30min; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。
公司正在出售的產(chǎn)品:
VacA ELISA Kit | c-myc癌基因產(chǎn)物ELISA試劑盒 |
apelin 13,AP13 ELISA Kit | Epigen蛋白ELISA試劑盒 |
DNA甲基轉(zhuǎn)移mei3AELISA試劑盒 | G抗原1ELISA試劑盒 |
GATA結(jié)合蛋白5ELISA試劑盒 | MRG結(jié)合蛋白ELISA試劑盒 |
大鼠細胞色suP4502E1(CYP2E1) 試劑盒 ELISA | 大鼠過氧化物mei體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒 |
血管緊張su1-9ELISA試劑盒 | 人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)ELISA試劑盒 |
人窖蛋白(Cav-1)試劑盒ELISA | IPO-38蛋白ELISA試劑盒 |
人轉(zhuǎn)錄因子SOX-5(SOX5)檢測試劑盒elisa | 擠奶工結(jié)節(jié)病毒PCR試劑盒 |
即森林腦炎病毒PCR檢測試劑盒 | 嗜水氣單胞菌(AH)核suan檢測試劑盒 |
新生隱球菌PCR試劑盒 | 肉孢子蟲通用PCR試劑盒 |
普雷沃菌屬通用PCR檢測試劑盒 | 即FAV-A)雞包涵體肝炎病毒病毒PCR試劑盒 |
班氏絲蟲PCR檢測試劑盒 | CYP2E1 大鼠細胞色suP4502E1ELISA檢測試劑盒 |
CA153ELISA 小鼠乳腺癌標志物-CA153ELISA試劑盒 | 即蜱傳腦炎病毒PCR檢測試劑盒 |
C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)ELISA試劑盒 | 石斑魚源性成分PCR試劑盒 |
血清淀粉樣P物質(zhì)(SAP)ELISA試劑盒 | C3a 人補體片斷3aELISA檢測試劑盒 |