藥用級大豆磷脂PC50口服級藥典檢測方法

藥用級大豆磷脂PC50口服級藥典檢測方法

[8030-76-0]

　　大豆磷脂系從大豆中提取精制而得的磷脂混合物。按無水物計算，含氮（N）應為1.5%～2.0%，磷（P）不得少于2.7%，磷脂酰膽堿不得少于45.0%，磷脂酰乙醇胺不得過30.0%，磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺總量不得少于70%。

　　【性狀】　本品為黃色至棕色的半固體、塊狀體。

　　本品在乙或乙醇中易溶，在丙酮中不溶。

　　酸值　本品的酸值（通則0713）應不大于30。

　　碘值　本品的碘值（通則0713）應不小于75。

　　過氧化值　本品的過氧化值（通則0713）應不大于3.0。

　　【鑒別】　（1）取本品約10mg，加乙醇2ml，加5%氯化鎘乙醇溶液1～2滴，即產(chǎn)生白色沉淀。

　?。?/span>2）取本品0.4g，加乙醇2ml，加硝酸鉍鉀溶液（取硝酸鉍8g，加硝酸20ml使溶解；另取碘化鉀27.2g，加水50ml使溶解，合并上述兩種溶液，用水稀釋至100ml）1～2滴，即產(chǎn)生磚紅色沉淀。

　　【檢查】　溶液的顏色　取本品適量，加乙醇制成每1ml中含6mg的溶液，照紫外-可見分光光度法（通則0401），在350nm的波長處測定吸光度，不得過0.8。

　　丙酮不溶物　取本品1.0g，精密稱定，加丙酮約15ml，攪拌使其溶解后，用G4垂熔玻璃坩堝濾過，殘渣用丙酮洗滌，洗至丙酮幾乎無色。殘渣在105℃干燥至恒重，不溶物不得少于90.0%。

　　己烷不溶物　取本品10.0g，精密稱定，加正己烷100ml，振搖使樣品溶解，用在105℃干燥1小時的G4垂熔玻璃坩堝濾過，錐形瓶用正己烷25ml洗滌兩次，洗液過濾后，G4垂熔玻璃坩堝于105℃干燥1小時，不溶物不得過0.3%。

　　殘留溶劑　取本品0.2g，精密稱定，置20ml頂空瓶中，加水2ml，密封，作為供試品溶液；另取乙醇、丙酮、乙、石油醚與正己烷各適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中分別約含200μg、200μg、200μg、50μg、27μg的溶液，作為對照品溶液。照殘留溶劑測定法（通則0861）試驗，用聚苯乙烯-二乙烯基苯（或極性相近）為固定液的毛細管柱（HP-PLOT/Q，30m×0.53mm，40μm）為色譜柱，起始溫度為160℃，維持8分鐘，以每分鐘5℃的速率升溫至190℃，維持6分鐘；氫火焰離子化檢測器（FID）；進樣口溫度為250℃，檢測器溫度為260℃；頂空瓶平衡溫度為80℃，頂空平衡時間為45分鐘。各色譜峰的分離度應符合要求。取供試品溶液與對照品溶液，分別頂空進樣，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算，含乙醇、丙酮、乙均不得過0.2%，石油醚不得過0.05%，正己烷不得過0.02%，總殘留溶劑不得過0.5%。

　　水分　取本品，照水分測定法（通則0832第一法）測定，含水分不得過1.5%。

　　重金屬　取本品1.0g，依法檢查（通則0821第二法），含重金屬不得過百萬分之二十。

　　砷鹽　取本品1.0g置于100ml標準磨口錐形瓶中，加入硫酸5ml，加熱至樣品炭化，滴加濃過氧化氫溶液，至反應停止后繼續(xù)加熱，滴加濃過氧化氫溶液至溶液無色，冷卻后加水10ml，蒸發(fā)至濃煙消失，依法檢查（通則0822第二法），應符合規(guī)定（0.0002%）。

　　鉛　取本品0.1g，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸5～10ml，混勻，浸泡過夜，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內(nèi)，進行消解。消解后，取消解罐置電熱板上緩緩加熱至棕紅色蒸氣揮盡并近干，用0.2%硝酸溶液轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，并用0.2%硝酸溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；同法制備試劑空白溶液；另取鉛單元素標準溶液適量，用0.2%硝酸溶液定量稀釋制成每lml中含鉛0～100ng的對照品溶液。取供試品和對照品溶液，以石墨爐為原子化器，照原子吸收分光光度法（通則0406第一法），在283.3nm的波長處分別測定，應符合規(guī)定（0.0002%）。

　　微生物限度　取本品，依法檢查（通則1105與通則1106），每1g供試品中需氧菌總數(shù)不得過10２cfu，霉菌和酵母菌總數(shù)不得過10２cfu，不得檢岀大腸埃希菌；每10g供試品中不得檢出沙門菌。

　　【含量測定】　氮　取本品0.1g，精密稱定，照氮測定法（通則0704）測定，計算，即得。

　　磷　對照品溶液的制備　精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的磷酸二氫鉀對照品0.0439g，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻（每1ml相當于0.04mg的磷）。

　　供試品溶液的制備　取本品約0.15g，精密稱定，置凱氏燒瓶中，加硫酸20ml與硝酸50ml，緩緩加熱至溶液呈淡黃色，小心滴加濃過氧化氫溶液，使溶液褪色，繼續(xù)加熱30分鐘，冷卻后，轉(zhuǎn)移至100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。

　　測定法　精密量取對照品溶液與供試品溶液各2ml，分別置50ml量瓶中，各依次加入鉬酸銨硫酸試液4ml，亞硫酸鈉試液2ml與新鮮配制的對苯二酚溶液（取對苯二酚0.5g，加水適量使溶解，加硫酸1滴，加水稀釋至100ml）2ml，用水稀釋至刻度，搖勻，暗處放置40分鐘，照紫外-可見分光光度法（通則0401），在620nm的波長處分別測定吸光度，計算含磷（P）量，即得。

　　磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺　照高效液相色譜法（通則0512）測定。

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗　用硅膠為填充劑（色譜柱Alltima Sillica，250mm×4.6mm，5μm或效能相當?shù)纳V柱），柱溫為40℃；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（85∶15∶0.45∶0.05）為流動相A，以正己烷-異丙醇-流動相A（20∶48∶32）為流動相B；流速為每分鐘1ml；按下表進行梯度洗脫；檢測器為蒸發(fā)光散射檢測器（參考條件：漂移管溫度為72℃；載氣流量為每分鐘2.0L）。

　　取磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰膽堿對照品各適量，用-甲醇（2∶1）溶解并稀釋制成每1ml中含上述對照品分別為50μg、100μg、100μg、200μg、200μg的混合溶液，取20μl注入液相色譜儀，各成分按上述順序依次洗脫，各成分分離度應符合要求，理論板數(shù)按磷脂酰膽堿峰、磷脂酰乙醇胺峰與磷脂酰肌醇峰計算均不低于1500。

　　測定法　取磷脂酰乙醇胺和大豆磷脂酰膽堿對照品各適量，精密稱定，加三-甲醇（2∶1）溶解并定量稀釋制成每1ml中含大豆磷脂酰膽堿分別為50μg、100μg、150μg、200μg、300μg、400μg，含磷脂酰乙醇胺分別為5μg、10μg、15μg、20μg、30μg、40μg的溶液，作為對照品溶液。精密量取上述對照品溶液各20μl注入液相色譜儀中，記錄色譜圖，以對照品溶液濃度的對數(shù)值與相應的峰面積對數(shù)值計算回歸方程；另精密稱取本品約15mg，置50ml量瓶中，加三-甲醇（2∶1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密量取供試品溶液20μl注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。由回歸方程計算磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺的含量，即得。

　　【類別】　口服用藥用輔料，乳化劑，增溶劑等

藥用級大豆磷脂PC50口服級藥典檢測方法