J774A.1小鼠單核巨噬細(xì)胞
名稱 | J774A.1 (小鼠單核巨噬細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
別稱 | J-774A.1; J774.A1; J774 A1; J774A.1; J 774A.1; J774 A.1 |
種屬 | 小鼠 |
年齡（性別） | 成年 |
組織來源 | 巨噬細(xì)胞 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞，不用胰消化 |
細(xì)胞形態(tài) | 單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞樣 |
背景描述 | J774A.1細(xì)胞來源于BABL/cN小鼠，有抗體依賴的吞噬作用，生長受硫酸葡聚糖、PPD和LPS的抑制；J774A.1細(xì)胞可產(chǎn)生IL-1β和大量的溶酶。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~17小時 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40?S+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ |
受體表達(dá)情況 | Complement (C3), expressed;Fc receptor, IgG, high affinity I (Fcgr1), expressed |
保藏機構(gòu) | ATCC; TIB-67 DSMZ; ACC-170 ECACC; 91051511 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
CRP ELISA Kit | 類天花病毒PCR試劑盒 |
Transforming Growth Factor Beta Receptor I(TGFbR1)ELISA Kit | 芽孢桿菌通用PCR試劑盒 |
amyloid beta peptide 1-42，Aβ1-42 ELISA Kit 96T | 膿腫分枝桿菌 |
AChRab ELISA Kit | 瓜納圖巴病毒PCR檢測試劑盒 |
PDGF ELISA Kit | 俄羅斯春夏腦炎病毒RT-PCR試劑盒 |
ai cerebral cortex(CC)autoaibody ELISA kit | 仙鶴草探針法PCR鑒定試劑盒 |
ATR ELISA Kit | 血吸蟲通用PCR試劑盒 |
tuberculosis aibody IgG，TB-Ab IgG ELISA Kit | 杜克雷嗜血桿菌PCR檢測試劑盒 |
ai-angiostrongylus caonensis aibody IgG ELISA Kit | 對蝦桿狀病毒PCR試劑盒 |
Transglutaminase 1, Keratinocyte(TGM1)ELISA Kit | 旋毛蟲通用PCR檢測試劑盒 |
PKB ELISA Kit | TRAIL-R3 小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3ELISA檢測試劑盒 |
TRAIL-R3 ELISA Kit | ANG-Ⅱ 人血管緊張suⅡELISA檢測試劑盒 |
transforming growth factors β2，TGFβ2 ELISA Kit | J774A.1小鼠單核巨噬細(xì)胞原鈣黏suα7(PCDHα7)ELISA試劑盒 |
ai signal recognition particle 54 kDa protein(SRP54)aibody ELISA kit | ANG-R-Tie2 大鼠血管生成su受體Tie2ELISA檢測試劑盒 |
Amylin ELISA Kit | ai-cartilage-Ab 人抗軟骨抗體ELISA檢測試劑盒 |
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