商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
T4 DNA Ligase(T4連接酶) | 500U | A-Hc2231 |
產(chǎn)品介紹:
濃 度: 5U/μl
產(chǎn)品概述:
在有Mg2+和ATP存在的條件下,T4 DNA Ligase能催化雙鏈 DNA或RNA上相鄰的5′-磷酸末端和3′-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅能夠催化雙鏈DNA的平末端或粘性末端之間的連接,還可以修復(fù)雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交雙鏈中的單鏈切刻,但不能催化單鏈 DNA 之間的連接。
保存條件:-20℃保存。
酶儲存緩沖液:
10 mM Tris-HCl (pH 7.5) ,50mM KCl,1mM DTT, 0.1mM EDTA,50% (v/v) glycerol。
5 × T4 DNA Ligase Buffer
250 mMTris-HCl (pH 7.5), 50mM MgCl2,50mM DTT, 5mM ATP,連接促進(jìn)劑。
來 源:純化于攜帶T4 DNA ligase 基因 的E. coli 菌株。
抑制劑和熱失活:
大于200mM的NaCl或KCl可以強(qiáng)烈抑制連接酶活性。65℃加熱 10分鐘或70℃加熱5分鐘即可失活。
單位定義:
在37℃,20分鐘內(nèi)交換1 nmole 的32PPi所需要的酶量定義為一個Weiss單位。本產(chǎn)品酶1U(Weiss Unit)相當(dāng)于200個粘性末端單位。在T4 DNA 連接酶反應(yīng)緩沖液中,16℃條件下,30分鐘能夠使50%的經(jīng)Hind III消化的λDNA 片段連接所需要的酶量為一個粘性末端單位。
質(zhì)量控制:
藍(lán)白斑分析實(shí)驗(yàn)表明白斑數(shù)小于2%;過量T4 DNA Ligase 混合超螺旋質(zhì)粒檢測實(shí)驗(yàn)表明無核酸酶檢出;SDS-PAGE檢測重組蛋白純度大于99%。
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