商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Strep-Tactin XT Resin | 5ml | A-PJ1102 |
產(chǎn)品介紹:
Strep-Tactin XT(Strep-Tactin 的升級(jí)產(chǎn)品)瓊脂糖凝膠 FF 是一種將 Strep-Tactin XT 共價(jià)交聯(lián)在瓊脂糖凝膠微球上,形成的生物親和層析分離介質(zhì)。該純化介質(zhì)主要用于純化 Strep tag II 或 Twin strep tag 標(biāo)簽蛋白。Strep tagII 標(biāo)簽為 8 個(gè)氨基酸的小標(biāo)簽(WSHPQFEK),由于標(biāo)簽小,僅為 1kDa 左右,一般不影響融合后蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,常用于融合表達(dá)蛋白質(zhì)的檢測(cè)和純化。由于 Strep-Tacin XT 對(duì) Strep tag II 標(biāo)簽具有高度特異性,一步純化就能獲得高純度的蛋白質(zhì)樣品。Strep tag II 標(biāo)簽蛋白與凝膠結(jié)合后可使用脫硫生物su競(jìng)爭(zhēng)方式進(jìn)行洗脫,該洗脫方式比較溫和,對(duì)蛋白影響極小。由于 Strep-Tactin 對(duì) Strep tag II 標(biāo)簽具有很強(qiáng)的吸附能力,在生物su的洗脫過(guò)程中不易洗脫,造成洗脫效率較低??梢酝ㄟ^(guò)在脫硫生物su洗脫液中添加 25mM NaOH 來(lái)提高蛋白回收效率,而添加 NaOH 后會(huì)造成 Strep-Tactin從填料上脫落,進(jìn)而污染純化蛋白。本產(chǎn)品為升級(jí)的 Strep-Tactin XT,其可耐受高濃度的 NaOH 洗脫(0.5M),除此外 Strep-Tactin XT 可耐受 1%SDS、6M 尿素,因此使用該填料可以在變性條件下純化標(biāo)簽蛋白。
儲(chǔ)存:4~8℃可保存 2 年。
保存液:10mM Tris-HCl,pH7.5;100mM NaCl;20%乙醇
實(shí)驗(yàn)用溶液:
(1) 結(jié)合緩沖液:根據(jù)自身蛋白性質(zhì)來(lái)定,一般推薦 50mM Tris-HCl(pH8.0), 150mM NaCl(或采用 PBS)
(2) 洗滌液與結(jié)合緩沖液相同,一般洗滌 5~20 個(gè)柱體積。
(3) 洗脫緩沖液:在結(jié)合緩沖液中加入 2.5~3.5mM D-Biotin?;蚋鶕?jù)蛋白性質(zhì)和用途靈活使用其它洗脫條件,如 2.5mMD-Biotin+10mM NaOH;25~50mM NaOH;0.2% SDS:
(4) 柱再生:0.2M NaOH 洗滌 3~5 個(gè)柱體積;1M NaCl 洗滌 3~5 個(gè)柱體積;PBS 平衡 3~5 個(gè)柱體積。
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