商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Benzonase 核酸酶 | 25KU、10000ku | A-PJ1103 |
產(chǎn)品介紹:
Benzonase 核酸酶是來自經(jīng)基因工程改進(jìn)的核酸內(nèi)切酶。它能降解所有形式(包括單鏈,雙鏈,線性和環(huán)狀)的 DNA 和 RNA 而沒有蛋白裂解活性,在廣泛條件范圍具有很高的特異性。它將核酸消化成3-5 堿基長度(雜交限度以下)的 5’-單磷酸寡核苷酸,從重級(jí)蛋白中去除核酸的操作,符合 FDA 關(guān)于核酸污染的處理規(guī)程。Benzonase 核酸酶迅速水解核酸的能力使該酶成為降低粘度以減少處理時(shí)間和增加蛋白產(chǎn)量的選擇。該酶與BacReady-Protein Extraction Solution和RIPA LysisBuffer 等蛋白抽提試劑配合使用,從而消除粗提物中的核酸,降低粘度。
單位定義:在 30 分鐘內(nèi)使△A260 值降低 1.0(相當(dāng)于消化 37 μg DNA )的酶量定義為一個(gè)活性單位。
應(yīng)用
蛋白提取時(shí)去除核酸污染
2D 凝膠電泳
Western Blot
IP- Western
儲(chǔ)存:置于-20°C 保存。
操作方法
1. 組織處理方法:將 30-50mg 動(dòng)植物組織研磨充分后,加入 100-200 μl RIPA 裂解液,同時(shí)加入 1 μlBenzonase 核酸酶,旋渦振蕩混合均勻,室溫孵育 30min。
2.細(xì)胞處理方法:將 106-107懸浮細(xì)胞液 6,000 rpm 離心10min 后,棄掉上清液,使用 100 μl RIPA 裂解液重懸細(xì)胞,同時(shí)加入 1μl Benzonase 核酸酶,旋渦振蕩混合均勻,室溫孵育 30min。注意:貼壁細(xì)胞重懸于 PBS 后,處理方法同懸浮細(xì)胞。
3. 大腸桿菌細(xì)胞處理:將 500 μl E.coli 培養(yǎng)液 8,000rpm 離心 5min 后,棄掉上清液,使用 100 μl 大腸桿菌裂解液重懸細(xì)胞,同時(shí)加入 1μl Benzonase 核酸酶,旋渦振蕩混合均勻,室溫孵育 30min。
4. 裂解步驟完成后,將裂解產(chǎn)物于 13,000 rpm 離心 10min后,取上清即為提取蛋白(包涵體蛋白留取沉淀為提取蛋白)。
5. 提取完蛋白后可利用 BCA 蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。
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