官方微信|手機(jī)版|本站服務(wù)|買家中心|行業(yè)動(dòng)態(tài)|幫助

產(chǎn)品|公司|采購(gòu)|招標(biāo)

增強(qiáng)型BCA蛋白定量試劑盒 濃縮型配方

參考價(jià)488.00-1506.00
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱上海炎熙生物科技有限公司
  • 品       牌炎熙生物
  • 型       號(hào)PD-BCA-E
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間2024/12/18 12:14:25
  • 訪問(wèn)次數(shù)1774
規(guī)格
PD-BCA-E2488.00元10000 套可售
PD-BCA-E1506.00元10000 套可售
在線詢價(jià) 收藏產(chǎn)品 進(jìn)入商鋪 同類產(chǎn)品

聯(lián)系方式:易經(jīng)理 查看聯(lián)系方式

該公司近期關(guān)注度58939

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是 制藥網(wǎng) 上看到的信息,謝謝!

上海炎熙生物科技有限公司成立于2015年8月,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,為科研機(jī)構(gòu)及企業(yè)研發(fā)提供各類試劑產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)的專業(yè)性公司。公司致力于生命科學(xué)領(lǐng)域的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和技術(shù)服務(wù),為廣大研發(fā)人員提供高性價(jià)比的生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)解決方案。本著“服務(wù)客戶,奉獻(xiàn)社會(huì)”的公司理念,秉持“嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)”的公司文化,我們未來(lái)將進(jìn)一步豐富和完善產(chǎn)品線,提供更多的生命科學(xué)領(lǐng)域的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。

 

 

支原體PCR檢測(cè)試劑盒,衣原體PCR檢測(cè)試劑盒,蛋白定量試劑盒,ECL發(fā)光液
產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn) 級(jí)別 其他
BCA蛋白定量試劑盒是一種基于二喹啉甲酸比色法的總蛋白檢測(cè)和定量試劑盒,快速靈敏,穩(wěn)定可靠,離子型和非離子型去污劑對(duì)其影響較小。增強(qiáng)型BCA蛋白定量試劑盒采用濃縮型配方,能檢測(cè)更低濃度的蛋白,檢測(cè)范圍低至0.5到20 μg/ml。
增強(qiáng)型BCA蛋白定量試劑盒 濃縮型配方 能檢測(cè)更低濃度的蛋白
增強(qiáng)型BCA蛋白定量試劑盒 濃縮型配方 產(chǎn)品信息

增強(qiáng)型BCA蛋白定量試劑盒

Enhanced Bicinchoninic Acid Kit for Protein Determination


貨號(hào)

組份A

組份B

組份C

BSA標(biāo)準(zhǔn)品

PD-BCA-E

250 ml

240 ml

12 ml

4 X 1 ml

BSA標(biāo)準(zhǔn)品為5 mg/ml BSA,溶于水中,含0.05%疊氮鈉。

本試劑盒可供480個(gè)試管或3296孔板測(cè)試用。


室溫運(yùn)輸和儲(chǔ)存。如因溫度低或長(zhǎng)時(shí)間放置出現(xiàn)沉淀,將其搖勻即可使用。BSA標(biāo)準(zhǔn)品保存在-20度,如出現(xiàn)微生物污染則應(yīng)丟棄。


產(chǎn)品簡(jiǎn)介

BCA蛋白定量試劑盒是一種基于二喹啉甲酸比色法的總蛋白檢測(cè)和定量試劑盒,比Lowry法更為*。BCA蛋白定量法以快速靈敏、穩(wěn)定可靠且對(duì)不同種類蛋白質(zhì)變異系數(shù)甚小而深受專業(yè)人士的青睞,樣品中離子型和非離子型去污劑對(duì)其影響較小,檢測(cè)不同蛋白質(zhì)分子的變異系數(shù)遠(yuǎn)小于考馬斯亮藍(lán)。BCA法的原理:在堿性環(huán)境下,蛋白質(zhì)將銅離子還原成亞銅離子,二喹啉甲酸(BCA)與亞銅離子形成紫色的絡(luò)合物,這種絡(luò)合物溶于水并在562 nm處產(chǎn)生光吸收峰值,光吸收強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)與蛋白質(zhì)含量呈近似線性關(guān)系,因此使用比色法可以對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)和定量。BCA法沒(méi)有反應(yīng)終點(diǎn),反應(yīng)會(huì)隨著時(shí)間而持續(xù)進(jìn)行;通過(guò)一段時(shí)間的孵育后,反應(yīng)速度會(huì)變慢,從而可以對(duì)大量樣品進(jìn)行檢測(cè)。

在蛋白質(zhì)的大分子結(jié)構(gòu)中,與BCA反應(yīng)顏色形成相關(guān)的是肽鍵和四種氨基酸(Cysteine,Cistine,Tryptophan,以及Tyrosine)。對(duì)二肽、三肽和四肽的研究表明,反應(yīng)顏色的形成不僅僅是單個(gè)的功能基團(tuán)效果疊加的結(jié)果。因此,蛋白濃度通常是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照蛋白(常用牛血清白蛋白BSA)推測(cè)而來(lái)的,即:將標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照蛋白的光吸收值做一個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)曲線,未知樣品的光吸收值參照曲線方程計(jì)算出蛋白濃度值。

增強(qiáng)型BCA蛋白定量試劑盒采用了濃縮型試劑配方,提高了孵育時(shí)間和溫度,因此可以增加樣品體積和增加光吸收值,從而能夠檢測(cè)更低濃度的蛋白,檢測(cè)范圍可低至0.520 μg/ml


標(biāo)準(zhǔn)蛋白和工作液的配制

A.       配制牛血清白蛋白梯度:可根據(jù)檢測(cè)范圍和預(yù)估的蛋白濃度來(lái)配制BSA濃度梯度,使用與待測(cè)樣品相同的溶劑??砂幢壤糯蠡蚩s小,根據(jù)實(shí)際需要計(jì)算所需用量。


B.       BCA工作液的配制

1.        根據(jù)需要測(cè)定的未知樣品和蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量以及復(fù)孔數(shù)來(lái)計(jì)算所需的BCA工作液體積。如使用試管進(jìn)行測(cè)試,每管需1.0 mL工作液, 而使用96孔板進(jìn)行測(cè)試則每孔需150 µl 工作液。

2.         組份A:組份B:組份C = 25:24:1 的比例配制BCA工作液。組份C加入組份A+B的時(shí)候,開(kāi)始會(huì)出現(xiàn)渾濁并隨著混勻很快消失,zui終混勻后溶液呈蘋果綠色。配置好的工作液在室溫密閉的條件下24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。


操作步驟

1.        如在試管中進(jìn)行反應(yīng),取1.0 mlBSA蛋白梯度或者待測(cè)樣品,放入標(biāo)記好的試管中,再每管加入1.0 ml 工作液,充分混勻, 蓋上蓋子,并在60°C 孵育60 minutes, 檢測(cè)范圍: 0.5-20 μg/ml。

延長(zhǎng)孵育時(shí)間會(huì)增加光吸收值;應(yīng)使用水浴法加熱,以使得溫度均衡上升;用鼓風(fēng)法升溫會(huì)導(dǎo)致溫度不均衡,使實(shí)驗(yàn)誤差增大。

2.        如需在96孔板中進(jìn)行反應(yīng),則每孔放入150 μlBSA蛋白梯度或者待測(cè)樣品,再加入150 μl工作液,充分混勻,37度孵育120分鐘,檢測(cè)范圍為2-40 μg/ml;注意溫度不要高于37度,否則會(huì)出現(xiàn)背景升高和反應(yīng)異常,大多數(shù)聚苯乙烯(polystyrene)微孔板會(huì)在60度出現(xiàn)霧化現(xiàn)象;應(yīng)使用水浴法加熱。

3.        將試管或96孔板冷卻至室溫。

4.        用分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀在562 nm處讀取光吸收值, 所有樣品應(yīng)在10分鐘內(nèi)讀完。因?yàn)?/span>BCA反應(yīng)沒(méi)有終點(diǎn),隨著時(shí)間的推移光吸收值會(huì)繼續(xù)上升,在10分鐘內(nèi)讀完所有樣品可以避免產(chǎn)生明顯的誤差。

5.        BSA蛋白標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品的光吸收值減去空白對(duì)照值,以得到的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品光吸收值對(duì)蛋白濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)這個(gè)曲線方程計(jì)算待測(cè)樣品的蛋白濃度。


注意事項(xiàng):

·          測(cè)定蛋白濃度時(shí),使未知樣品的蛋白濃度處于標(biāo)準(zhǔn)擬合曲線的接近中間位置,這樣獲得的結(jié)果更準(zhǔn)確。

  • 通過(guò)增加孵育時(shí)間或者提高樣品比例,可以提高光吸收值,從而檢測(cè)更低的蛋白量,但是會(huì)縮小檢測(cè)范圍,可根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行調(diào)整,同時(shí)注意不要超過(guò)儀器的檢測(cè)上限。

·          zui適檢測(cè)波長(zhǎng)為562 nm540 nm590 nm區(qū)間也可進(jìn)行檢測(cè), 但標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率和檢測(cè)靈敏度都會(huì)有所降低。

·          酶標(biāo)儀的檢測(cè)光徑比分光光度計(jì)的比色杯短,因而檢測(cè)靈敏度有所降低。

·          用軟件對(duì)酶標(biāo)儀的讀數(shù)進(jìn)行曲線擬合時(shí),采用best-fit polynomial equation進(jìn)行擬合可以獲得比線性擬合更準(zhǔn)確的結(jié)果;手工擬合時(shí)可采用線性擬合法。

·          EDTA濃度必須小于0.5 mM,不兼容EGTA。不適用BCA法時(shí),請(qǐng)使用Bradford蛋白濃度測(cè)定法。

·          每種常用的總蛋白測(cè)定方法測(cè)定不同的蛋白時(shí)都有一些偏差。導(dǎo)致產(chǎn)生這些偏差的原因有:蛋白質(zhì)的氨基酸序列,等電點(diǎn),蛋白的結(jié)構(gòu),特定種類的氨基酸側(cè)鏈和輔基。有些種類的氨基酸側(cè)鏈和輔基能對(duì)顯色反應(yīng)產(chǎn)生很大的影響。大部分蛋白測(cè)定方法都使用牛血清白蛋白(BSA)或免疫球蛋白(IgG)作為標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果需要特別精確的檢測(cè)結(jié)果,可以使用待測(cè)蛋白的純品來(lái)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

·          一些物質(zhì)可以干擾BCA反應(yīng),如還原劑、絡(luò)合劑,以及強(qiáng)酸和強(qiáng)堿。還有一些物質(zhì)干擾較小,只要不超過(guò)zui大兼容濃度即不影響反應(yīng)的進(jìn)行。

·          本產(chǎn)品僅供專業(yè)人員的科學(xué)研究用。

·          為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。


常見(jiàn)問(wèn)題


問(wèn)題

可能原因

解決辦法

沒(méi)有顏色

樣品中含有銅離子絡(luò)合劑

1,透析,脫鹽,或稀釋樣品;

2,提高工作液中銅離子的濃度,如將組份C的比例增加一倍;

3,使用蛋白沉淀法去除干擾物

空白對(duì)照孔光吸收值正常,但是蛋白標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品光吸收值低于預(yù)期

樣品所用溶劑是強(qiáng)酸堿性緩沖液,改變了工作液的pH

透析,脫鹽,或稀釋樣品

光吸收波長(zhǎng)選擇錯(cuò)誤

562 nm讀取光吸收值。

待測(cè)樣品孔光吸收值高于預(yù)期

蛋白濃度過(guò)高

稀釋樣品

樣品中含有脂類或脂蛋白

向樣品中加入2% SDS以除去脂類干擾

使用蛋白沉淀法去除干擾物

所有孔,包括空白對(duì)照孔,呈暗紫色

緩沖液中含有還原劑

1,透析或稀釋樣品;

2,使用蛋白沉淀法去除干擾物

緩沖液中含有硫醇

緩沖液中含有生物胺(兒茶酚胺)

需要用不同的波長(zhǎng)讀取光吸收值

酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)沒(méi)有562 nm濾光片

可以讀取540 nm590 nm區(qū)間的光吸收值, 但是標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率和檢測(cè)靈敏度都會(huì)降低。


增強(qiáng)型BCA蛋白定量試劑盒 濃縮型配方 能檢測(cè)更低濃度的蛋白


增強(qiáng)型BCA蛋白定量試劑盒 濃縮型配方 能檢測(cè)更低濃度的蛋白






關(guān)鍵詞:標(biāo)準(zhǔn)品
在找 增強(qiáng)型BCA蛋白定量試劑盒 濃縮型配方 產(chǎn)品的人還在看

提示

×

*您想獲取產(chǎn)品的資料:

以上可多選,勾選其他,可自行輸入要求

個(gè)人信息: