當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>PCR相關試劑>>蛋白相關>> A-PJ1111rTEV蛋白酶
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
rTEV蛋白酶 | 1000U | A-PJ1111 |
產(chǎn)品介紹:
rTEV 蛋白酶(重組型)是經(jīng)過基因工程改造后的重組蛋白酶,該酶特異性識別 Glu-Asn- Leu-Tyr -Phe-Gln-Gly七氨基酸序列,并高特異性、高活性剪切(剪切位點在Gln-Gly之間)。該酶經(jīng) 6×His 標簽純化而得(含組氨標簽),純度達99%,剪切反應完畢后可通過 Ni-NTA Resin )去除。該酶在 4℃-30℃溫度、pH 范圍(6.0-8.5)反應條件下均具有活性(見下表)。
活性定義:在 1×rTEV Buffer(50 mM,pH8.0, 0.5 mM EDTA,1mM DTT),30℃反應 1h,剪切>85%的 3 μg 底物所需要的酶量定義為一個活性單位。
應用:融合蛋白標簽剪切去除。
儲存:長期儲存-70℃,可儲存 2 年,-20℃可儲存 6 個月。
操作方法
1. 在 EP 管中配制如下反應體系
融合蛋白 20 μg
20×rTEV Buffer 7.5 μl
0.1M DTT 1.5 μl
rTEV Protease 1-3 μl
ddH20 Up to 150 μl
2. 30℃孵育,在 1、2、4、6 小時分別吸出 30 μl 上述反應液,置于單獨的 EP 管中。
3. 向上述 EP 管中加入 30 μl 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。
4. 樣品全部反應完畢后,樣品煮沸 5 min,取 40 μl 進行SDS-PAGE 分析。
5. 如融合蛋白要求低溫處理,可將反應液置于 4℃,請延長反應時間,并增加 rTEV 酶用量。
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