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當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> AS632185多胺氧化酶(PAO)測試盒(比色法)

多胺氧化酶(PAO)測試盒(比色法)

參  考  價:900 - 1700
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號

    AS632185

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    代理商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

100管/96樣 1700元 15盒可售

50管/48樣 900元 15盒可售

更新時間:2023-10-13 11:42:35瀏覽次數(shù):3450次

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產(chǎn)地 國產(chǎn) 規(guī)格 100管/96樣、50管/48樣
級別 其他
多胺氧化酶(PAO)測試盒(比色法)是催化生物體內(nèi)多胺氧化的關(guān)鍵酶,通過調(diào)節(jié)體內(nèi)多胺水平和生成物的濃度,參與各種植物體對逆境脅迫的反應(yīng)和生長發(fā)育過程。

本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

AS632185

多胺氧化酶(PAO)測試盒(比色法)

100管/96樣

AS632185

多胺氧化酶(PAO)測試盒(比色法)

50管/48樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:                           

多胺氧化酶是催化生物體內(nèi)多胺氧化的關(guān)鍵酶,通過調(diào)節(jié)體內(nèi)多胺水平和生成物的濃度,參與各種植物體對逆境脅迫的反應(yīng)和生長發(fā)育過程。

測定原理:

PAO催化多胺氧化產(chǎn)生過氧化氫,在過氧化物酶存在的條件下與底物顯色,在550nm下有特征吸收峰,通過測定吸光值增加速率來反映PAO活性。

需自備的儀器和用品:

酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體120mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:液體3mL×1瓶,4℃保存;

試劑三:液體1.5mL×1瓶,4℃保存;

試劑四:液體1.5mL×1瓶,4℃保存。

粗酶液提取:

組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心20min,取上清,置冰上待測。

細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

血清等液體:直接測定。

測定步驟:

  1. 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至550nm。

  2. 樣本測定

試劑名稱(µL)

測定管

試劑一

140

試劑二

20

試劑三

10

樣本

20

試劑四

10

迅速混勻,于550nm下測定初始吸光值A(chǔ)1與30min后吸光值A(chǔ)2。ΔA=A2-A1。

PAO活性計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位定義:每mg組織蛋白在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位。

PAO(U/mg prot)=ΔA×V反總÷(V樣×Cpr)÷0.001÷T =333.33×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:

單位定義:每g組織在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位。

PAO(U/g 鮮重)=ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.001÷T =333.33×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:

單位定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位。

PAO(U/104 cell)=ΔA×V反總÷(500×V樣÷V樣總)÷0.001÷T =0.667×ΔA

  1. 按液體體積計算

單位的定義:每mL液體樣本在每mL反應(yīng)體系中每分鐘A550變化0.001為一個酶活力單位。

PAO(U/mL)=ΔA×V反總÷V樣÷0.001÷T =333.33×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,0.2mL;V樣:加入樣本體積,0.02 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,30 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500萬。

1.jpg


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