當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>PCR試劑>>PCR檢測試劑盒>> 血球鏈菌PCR檢測試劑盒說明書
產(chǎn)地 | 進口 | 產(chǎn)品新舊 | 全新 |
---|---|---|---|
自動化程度 | 其他 |
特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 血球鏈菌PCR檢測試劑盒說明書 |
英文名稱 | Globicatella sanguinisPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
?
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
人殼三糖酶1(Chitotriosidase-1)ELISA試劑盒51014-29-0 20mgIsocorynoxeine HPLC≥98% 15.6-1000 pg/mL異去氫鉤藤堿;異柯諾辛因堿
TEK/Tie2/CD202b抗體,鼠單抗21096HPLC≥98%A060420mg/支ELISA 棕櫚酸
ELISAKitforHumanProteinKIBRA1G 78-5000 pg/mL鈹試劑 III Beryllon III
AMIGO2/AMIGO-2/alivin1抗體,兔多抗,抗原親和純化13657-68-6C15H24O2Curdione≥98%ELISA IHC-P 莪二
人鏈接斑珠蛋白(Junctionplakoglobin)ELISA試劑盒1g 0.156-10 ng/mL(+)-冰片 BORNEOL, (+)-(SG)
肌測定培養(yǎng)基/InositolAssayBroth165-12155嬰幼兒配方食品和粉中肌測定wako 165-12155 子起生物
ELISAKitforPentosidine1mg 1.56-100 ng/mLDEACETYL-7-XYLOSYLCEPHALOMANNINE, 10-(RG)
尿素酶發(fā)酵管404-82-0BR404-82-0 芬拉明標準品
人分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)ELISA試劑盒5 x 5mg 1.25-80 ng/mL紅景天標準品試劑盒 GOLDENROOT (RHODIOLA ROSEA) STANDARDS KIT(P)
大鼠狀腺上皮細胞 20mg HPLC≥98%Curdione用于含量測定5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶莪術(shù)二;姜黃二;莪二
SMAC/Diablo抗體,兔多抗,抗原親和純化5mgELISA WB IP 隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(RG)
ELISAKitforHumanVasopressinV1areceptor29307-60-6 20mgGenipin-1-b-D-gentiobioside HPLC≥98% 1.56-100 ng/mL京尼平龍膽雙糖苷;京尼平-1-β-D-龍膽雙糖苷
人抗頂體蛋白抗體(ACR)ELISA試劑盒29956-99-8 20mgDi-tert-octyl Disulfide HPLC≥98% 0.156-10 ng/mL氯化天竺葵素
人CCAAT增強子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒2050-87-5 20mg Alltride 0.312-20 ng/mL大蒜素(含量測定)
ComplementC1s抗體,兔單抗87701-68-6C15H26O2Alismoxide HPLC≥98%ELISA 環(huán)氧澤瀉
ELISAKitforHumanPotassium/sodiumhyperpolarization-activatedcyclicnucleotide-gatedchannel479103-90-55mg Polygalasaponin XXXI 0.312-20 ng/mL瓜子金皂苷XXXI
血球鏈菌PCR檢測試劑盒說明書補骨脂寧 C20H16O4 Corylin PFD2/PFDN2抗體,兔多抗 ≥98%
蒺藜皂苷標準品試劑盒 TRIBULUS SAPONIN STANDARDS KIT(P) 2 x 5mg ELISAKitforHumanThimetoligopeptidase
沒食子兒茶素、表沒食子兒茶素標準品 059-08951 小牛血清/Calfserum
異酰紫草素 10mg Isovalerylshikonin ELISAKitforInositoltrisphosphate
二硫化四乙基秋蘭姆 Tetraethylthiuram Disulfide >97.0%(T) 25G 人CD43分子(CD43)ELISA試劑盒
和厚樸 HPLC≥98% A0181 PARP-1/PARP抗體,鼠單抗 20mg/支
兩性電解質(zhì)3-10 12ml 改良Skirrow瓊脂添加劑
橙皮苷;桔皮甙;陳皮甙;柑果甙;二氫黃甙;橙皮苷;二氫黃苷 HPLC≥98% Hesperidin 小鼠胚胎成纖維細胞,3T3-L1細胞 用于含量測定
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責,制藥網(wǎng)對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。