當(dāng)前位置:天津天正信達(dá)生物科技有限公司>>核酸合成與提取>>RNA快速提取試劑盒>> HRN0411骨組織RNA快速提取試劑盒
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 級別 | 其他 |
---|
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 |
骨組織RNA快速提取試劑盒 | HRN0411 | 50T |
產(chǎn)品描述
骨組織堅(jiān)硬、骨細(xì)胞密度低、而且外周基質(zhì)含有大量黏蛋白(蛋白多糖)和RNA難以分離,無法用傳統(tǒng)Trizol法進(jìn)行高質(zhì)量提取。本試劑盒采用的不含benf/氯仿配方的裂解液,并添加多種成分去除骨組織蛋白多糖。同時(shí)基因組DNA清除柱技術(shù)可以有效清除gDNA殘留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR等實(shí)驗(yàn)。裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶, 離心沉淀去除多糖和次級代謝產(chǎn)物,然后裂解混合物用乙醇調(diào)節(jié)RNA結(jié)合吸附到基因組DNA清除柱,然后RNA被選擇性洗脫濾過, 吸附在基因組DNA清除柱上的殘留DNA無法洗脫連同柱子一起丟棄從而清除掉DNA。濾過的RNA用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后,RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物,蛋白等雜質(zhì)去除, 最后低鹽的RNase free H20將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1.不使用有毒的benfei,氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。
2.簡捷,單個(gè)樣品操作一般可在35分鐘內(nèi)完成,世界上簡單快速的試劑盒。
3.研發(fā)成功基因組DNA清除柱技術(shù)可以有效清除gDNA殘留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR等實(shí)驗(yàn)。
4.適應(yīng)性廣泛,可以提取各種骨組織包括礦化骨組織。
5.多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9~2.2,基本無DNA殘留,可用于RT-PCR,Northern-blot,二代測序和各種實(shí)驗(yàn)。
運(yùn)輸和保存方法
1)本試劑盒在室溫儲存12個(gè)月不影響使用效果。
2)不合適的儲存于低溫(4℃或者-20℃)會造成溶液沉淀,影響使用效果,因此運(yùn)輸和儲存均在室溫下(15℃-25℃)進(jìn)行。
3)避免試劑長時(shí)間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、PH值變化,各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。
骨組織RNA快速提取試劑盒
注意事項(xiàng)
1.所有的離心步驟均可在室溫完成(4℃離心也可以),使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13,000 rpm的傳統(tǒng)臺式離心機(jī),如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。
2.需要自備乙醇,研缽或者其它合適的破碎骨組織裝置。
3.樣品處理量不要超過基因組清除柱DA和和RNA吸附柱RA處理能力,否則造成DNA殘留或產(chǎn)量降低。開始摸索實(shí)驗(yàn)條件時(shí),如果不清楚樣品DNA/RNA含量時(shí)可使用較少的樣品處理量, 將來根據(jù)樣品試驗(yàn)情況增加或者減少處理量。
4.裂解液CLB和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作時(shí)戴乳膠手套,避免沾染皮膚,眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí),要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
5.關(guān)于DNA 的微量殘留:
一般說來任何總RNA提取試劑在提取過程中無法避免DNA的微量殘留(DNase消化也無法做到無殘留),本公司的RNA提取產(chǎn)品,由于采取了的緩沖體系和基因組DNA清除柱技術(shù),絕大多數(shù)DNA已經(jīng)被清除,不需要DNase消化,可直接用于反轉(zhuǎn)錄PCR和熒光定量PCR。個(gè)別特殊情況如DNA含量過于豐富造成殘留或者要進(jìn)行嚴(yán)格的mRNA表達(dá)量分析熒光定量PCR,我們建議在進(jìn)行模板和引物的選擇時(shí):
1)選用跨內(nèi)含子的引物,以穿過mRNA中的連接區(qū),這樣DNA就不能作為模板參與擴(kuò)增反應(yīng)。
2)選擇基因組DNA和cDNA上擴(kuò)增的產(chǎn)物大小不一樣的引物對。
3)將RNA提取物用RNase-free的DNase I 處理。本試劑盒還可以用于DNase I處理后的RNA清潔(cleanup) ,請聯(lián)系我們索取具體操作說明書。
4)在步驟去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱RA上進(jìn)行DNase I柱上消化處理。購買DNA酶柱上消化試劑盒(貨號:RN34)前可先索取具體操作說明書。。
6. 本產(chǎn)品僅作科研用途!
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),制藥網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。