人血管生成素相關生長因子AGF
自備物品 1.酶標儀(盡量提前預熱) 2.微量加液器、吸頭 3.蒸餾水或去離子水以及濾紙 操 作 步 驟 1. 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實驗過程應在室 溫(20-25℃)內進行。 2. 取出酶標板,按照標準品的次序分別加入100μl的標準品溶液于空白微孔中。 3. 空白微孔中加入100μl的樣品,空白對照加入100μl的蒸餾水; 4. 在各孔中加入50μl的酶標記溶液;(不含空白對照孔) 5. 將酶標板用封口膠密封后,37℃孵育反應 1小時;(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度) 6. 充分清洗酶標板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋) 7. 酶標板洗滌后用吸水紙*拍干; 8. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對照孔) 9. 20-25℃下避光反應15分鐘; 10. 各孔加入50μl終止液,終止反應; 結 果 判 斷 1. 30分鐘內在波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值; 2. 百分結合率計算:設S0管計數(shù)為B0,各標準管或樣品管計數(shù)為B,非特異管計數(shù)為NSB,則百分結合率計算公式如下:B/ B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×* 3. logit計算:各標準點或樣品管的logit值計算公式如下:logit=ln(B/ B0)/(1-B/ B0) 4. 將標準品的OD均值與標準品0點的OD均相除,為標準點的百分結合率,在log-logit坐標紙上繪圖。 5. Log-logit雙對數(shù)標準曲線:坐標紙上橫軸從左至右*個1-9表示為*個10進位,第二個1-9表示為第二個10進位。第三個1-9表示為第三個10進位。坐標紙縱軸為百分比(1-99),即各標準吸光值的百分結合率。取一條通過各點的直線。要求盡可能多的點在線上,同時剩余的點均勻分布在直線的兩邊。樣品也同樣由吸光值計算百分結合率,再從縱軸上的相應結合率找到直線上的點,此點對應的橫坐標濃度即為樣品的濃度,無須換算。 6. 人工處理:以標準濃度取log值為橫坐標,對應的logit值為縱坐標在普通坐標紙上或以標準濃度為橫坐標,對應的B/B0為縱坐標在logit-log坐標紙上畫出標準曲線(理想化時是一條直線)。根據(jù)待測樣品的B/B0可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。如果使用普通坐標紙,查出的數(shù)值應取反對數(shù)才是zui后的濃度值。 7. 自動處理:使用logit-log或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式,由電腦自動計算得出結果。 8. 敏感度:1.0pg/ml;
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主要組成成分:試劑
性狀:液體
本試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床及診斷使用!
規(guī)格:96T48T
貯藏:2-8°C
人血管生成素相關生長因子AGF 產品信息
關鍵詞:標準品
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