商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Lambda核酸外切酶 | 1000U、5KU | A-PJ1118 |
產(chǎn)品介紹:
Lambda 核酸外切酶作用于雙鏈 DNA,沿 5′→3′方向逐步切去 5′單核苷酸。最適底物是 5′磷酸化的雙鏈DNA,也能緩慢降解單鏈 DNA 和非磷酸化底物。該酶不能從 DNA 的切刻或缺口處起始消化。
活性定義:1 單位指在 50 μl 反應(yīng)體系中,37℃條件下,30分鐘內(nèi)能從雙鏈 DNA 底物上催化產(chǎn)生 10 nmol 酸溶性脫氧核糖核苷酸所需的酶量。
使用注意事項(xiàng)
(1)1×Lambda Exo Buffer:67 mM Glycine-KOH(pH 9.4@ 25℃),2.5 mM MgCl2,50 μg/ml BSA,37℃溫育。
(2)該酶的最佳反應(yīng)溫度為 37°C,75°C 10min 可失活。
(3)5′-0H 端的切割速度比 5′-PO4端慢 20 倍,單鏈 DNA 比雙鏈 DNA 慢 100 倍。
操作方法:
1.配置反應(yīng)體系如下:
DNA 2~5 μg
10×Lambda Exo Buffer 5 μl
Lambda Exonuclease 1 μl
ddH2O upto 50 μl
2. 37℃反應(yīng) 30min 。
3. 75℃ 10min 進(jìn)行熱失活。
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