斑點(diǎn)熱立克次體IgG檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：斑點(diǎn)熱立克次體IgG抗體試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Spotted fever Rickettsia IgG Antibody Kit
【產(chǎn)品規(guī)格】
96T
【預(yù)期用途】
該試劑盒用于人血清、血漿中抗斑點(diǎn)熱立克次體IgG的體外定性檢測(cè)。
【前言簡(jiǎn)介】
斑點(diǎn)熱立克次體出現(xiàn)在全球范圍內(nèi)，并且通過(guò)受到感染的扁虱、螨蟲和跳蚤進(jìn)行傳播。人體受感染后會(huì)誘導(dǎo)產(chǎn)生出特異性的抗體回應(yīng)，產(chǎn)生的特異性抗體是可以被檢測(cè)到的，因此可以被當(dāng)做一種間接的檢測(cè)手法來(lái)診斷受感染的人群。
【檢測(cè)原理】
試劑盒微孔板中包被有從斑點(diǎn)熱立克次體中提取出的脂多糖（rLPS）。病人血清用樣品稀釋液稀釋，之后樣品被加入到微孔中孵育。孵育過(guò)程中，血清抗體與微孔板抗原發(fā)生特異性結(jié)合。洗板洗去未結(jié)合的部分，之后加入酶標(biāo)的抗人IgG。孵育過(guò)后洗板，洗去未結(jié)合上的酶聯(lián)物。之后加入酶底物液反應(yīng)。形成藍(lán)色，顏色的深度與樣品中特異性IgG的濃度成正比。定時(shí)反應(yīng)后，加入終止液，顏色變黃，微孔板使用酶標(biāo)儀在450nm下讀取吸光值。
【試劑盒成分】
微孔板 12×8
包被有斑點(diǎn)熱立克次體外脂多糖抗原（rLPS）
樣品稀釋液 2×50ml
含牛血清蛋白及吐溫20、硫化汞的PBS緩沖液 即用型
酶聯(lián)物 1×12ml
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗人IgG 即用型 避光保存
陽(yáng)性質(zhì)控 1×120μl 1:10預(yù)稀釋
臨界質(zhì)控 1×200μl 1:10預(yù)稀釋
陰性質(zhì)控 1×120μl 1:10預(yù)稀釋
底物液 1×12ml
琥珀色瓶，含TMB底物液以及雙氧水 即用型 避光保存
終止液 1×12ml
含稀釋好的硫酸 即用型 避免接觸皮膚
PBS緩沖液
將試劑盒提供的小包加入到1L蒸餾水中 以配置PBS緩沖液
吐溫20 1×2ml
加入到1L的PBS緩沖液中 配制成洗液。
所需材料（未提供）
1. 蒸餾水
2. 洗瓶
3. 試管
4. 移液器
5. 粘性蓋板
6. 450nm讀數(shù)酶標(biāo)儀
【儲(chǔ)存及穩(wěn)定】
試劑盒應(yīng)2-8℃保存，在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)先平衡至室溫（20-25℃）。剩余的微孔板需密封保存在包裝袋中。
【樣品采集及處理】
允許全血樣品凝集，通過(guò)離心分離血清樣品。2-8℃下保存。要保存5天以上，請(qǐng)于-20℃環(huán)境下保存。
【檢測(cè)方法】
洗滌液
將2ml吐溫加入到1L配制好的PBS緩沖液中，混勻。
樣品
使用樣品稀釋液按1:100比例稀釋樣品。
質(zhì)控品
使用樣品稀釋液按1:10比例稀釋已經(jīng)預(yù)稀釋的質(zhì)控品。最終得1:100稀釋的質(zhì)控品。
檢測(cè)過(guò)程
1. 移取陽(yáng)性質(zhì)控、陰性質(zhì)控、臨界質(zhì)控、樣品各100μl到相應(yīng)的微孔中，臨界質(zhì)控做雙孔檢測(cè)。
2. 蓋板，在室溫下孵育60分鐘。
3. 使用洗滌液洗板至少3次，并在吸水紙上拍干。
4. 每孔加入100μl酶聯(lián)物。
5. 蓋板，在室溫下避光孵育30分鐘。
6. 洗板同步驟3。
7. 每孔加入100μl TMB底物液，暗光下準(zhǔn)確孵育10分鐘。
8. 每孔加入100μl終止液。
9. 使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下讀取吸光值。
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