單B細(xì)胞篩選技術(shù)服務(wù)：
單個(gè)B細(xì)胞抗體技術(shù)作為新一代抗體開發(fā)技術(shù)，可以從單個(gè)B細(xì)胞中高效、快速的分離抗體，是繼雜交瘤、噬菌體展示后又一抗體產(chǎn)生技術(shù)的突破。可利用單B細(xì)胞篩選技術(shù)制備兔、鼠、駝、羊、雞等多物種的單克隆抗體，單B細(xì)胞技術(shù)具有高特異性、高活性和高親和力等突出優(yōu)勢，卡梅德科技基于單B細(xì)胞篩選平臺，從篩選時(shí)間到獲得高質(zhì)量的抗體均有優(yōu)勢，可提供從抗原設(shè)計(jì)、合成與修飾到動物免疫、單B細(xì)胞富集篩選，表達(dá)與純化，功能驗(yàn)證等一站式技術(shù)服務(wù)，滿足客戶不同的需求。
卡梅德科技(KMD Bioscience) 基于單B細(xì)胞篩選平臺提供相應(yīng)的不同物種的抗體制備服務(wù)，并且可通過抗體測序，獲得序列信息一站式的服務(wù)也為客戶提供更優(yōu)質(zhì)的選擇，滿足您的需要，配合抗體生產(chǎn)平臺、抗體發(fā)現(xiàn)平臺等助您快速獲得高質(zhì)量的抗體。
單B細(xì)胞篩選技術(shù)服務(wù)流程：
1）單個(gè)B細(xì)胞的分離
單B細(xì)胞可以通過隨機(jī)分離和抗原特異性分離兩種方式，從外周血或淋巴組織中提取。隨機(jī)B細(xì)胞分離可采用顯微操作、激光捕獲顯微切割或熒光激活細(xì)胞分選（FACS）等技術(shù)進(jìn)行篩選?？乖禺愋苑蛛x則可以使用抗原包被的磁珠、熒光標(biāo)記抗原的多參數(shù)FACS、溶血斑塊實(shí)驗(yàn)或熒光焦點(diǎn)法來篩選特異性B細(xì)胞。利用FACS技術(shù)，研究人員能夠根據(jù)特定細(xì)胞表面標(biāo)志物的表達(dá)模式，清晰區(qū)分待分選B細(xì)胞的發(fā)育和分化階段，幾乎可以從任何階段的B細(xì)胞中進(jìn)行分選。為確保獲得特異性抗體，需在單細(xì)胞分離前評估供體的免疫應(yīng)答，例如通過酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)（ELISPOT）測定外周血中抗體特異性細(xì)胞（ASC）的豐度，從而選擇含有較高抗原特異性抗體濃度的血樣進(jìn)行后續(xù)制備。
2）單B細(xì)胞抗體的測序和克隆
單細(xì)胞的cDNA合成通常在96孔板上進(jìn)行。全長免疫球蛋白（Ig）基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物通過巢式或半巢式RT-PCR擴(kuò)增。對于抗體重鏈和輕鏈的可變區(qū)，設(shè)計(jì)前向引物的混合物，而反向引物則特異性互補(bǔ)于抗體的恒定區(qū)。在某些情況下，如果需要分離和擴(kuò)增不同同種型的抗體，反向引物將是特異性互補(bǔ)于各類同種型抗體恒定區(qū)的混合物。擴(kuò)增后的基因可直接轉(zhuǎn)染至哺乳動物細(xì)胞中，以實(shí)現(xiàn)單克隆抗體的體外表達(dá)。
3）抗體的表達(dá)和篩選
在鑒定抗體或抗體片段的抗原特異性和生物活性之前，需要將攜帶抗體基因的表達(dá)載體在適當(dāng)?shù)南到y(tǒng)中進(jìn)行表達(dá)。常見的表達(dá)系統(tǒng)是原核系統(tǒng)（如大腸桿菌），而哺乳動物細(xì)胞系統(tǒng)（如HEK 293或CHO細(xì)胞）則更適合進(jìn)行抗體的翻譯后修飾，主要采用瞬時(shí)表達(dá)或穩(wěn)定表達(dá)。在大腸桿菌中，通?？贵w基因以抗原結(jié)合片段（Fab）的形式表達(dá)，而在哺乳動物細(xì)胞中，則以完整的IgG形式進(jìn)行表達(dá)。通過這一系列步驟，研究人員能夠高效獲得特異性抗體，為后續(xù)的應(yīng)用提供支持。
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