美國(guó)NOVABIOS恙蟲病IgG抗體 ELISA檢測(cè)試劑
美國(guó)NOVABIOS恙蟲病IgG抗體 ELISA檢測(cè)試劑
西尼羅河乙腦(日本腦炎)登革熱腺病毒(糞便)軍團(tuán)菌萊姆病加斯病(克錐蟲)利什曼蟲(黑熱?。┢苽L(fēng)鉤端螺旋體沙眼衣原體白喉布魯氏桿菌流感 。
【預(yù)期用途】
恙蟲病IgG ELISA試劑盒可用來(lái)檢測(cè)人是否感染恙蟲病東方螺旋體(OT),它是檢測(cè)血漿或血清中抗恙蟲病東方螺旋體源性重組抗原的IgG抗體的一種ELISA檢測(cè)系統(tǒng)。此實(shí)驗(yàn)可輔助診斷人是否感染了恙蟲病東方螺旋體,此試劑盒不能用于篩查血液或血液成分,僅供體外診斷用。
【檢測(cè)原理】
恙蟲病IgG ELISA試劑盒是一種定量檢測(cè)人血清和血漿中抗OT IgG抗體的酶免試劑。包被板的微孔中包被了重組抗原混合物(如下)。在檢測(cè)的時(shí)候,血清應(yīng)當(dāng)用Inbios的樣品稀釋液稀釋后再加入微孔中,具體請(qǐng)見(jiàn)如下的“血清應(yīng)用范例”。在溫育并洗板后,在微孔中加入HRP標(biāo)記的IgG酶聯(lián)物。溫育并洗板,再向微孔中加入TMB底物液并溫育。后再加入酸性終止液,并在450nm檢測(cè)底物反應(yīng)的程度。所檢測(cè)到的OD值與樣品中IgG抗體的濃度成正比。陰性質(zhì)控和弱陽(yáng)性質(zhì)控以內(nèi)在質(zhì)控形式提供,其目的是為了監(jiān)測(cè)試劑盒成分的完整性。如果樣品與抗原間發(fā)生了反應(yīng),則樣品應(yīng)當(dāng)被認(rèn)為是陽(yáng)性的。
【檢測(cè)步驟】
將所有的試劑成分和樣品都平衡至室溫。實(shí)驗(yàn)前反復(fù)倒置以便試劑和樣品混合均勻。陽(yáng)性質(zhì)控、陰性質(zhì)控和未知血清都必須做雙份檢測(cè)。
1) 確定好所需檢驗(yàn)的血清樣品量。
2) 按照如下的“血清應(yīng)用范例”組織血清樣品(僅供參考,用戶也可以自己設(shè)置相應(yīng)的位置),用戶可以雜試管或ELISA塑料板內(nèi)稀釋樣品。
3) 用樣品稀釋液將樣品稀釋50倍(您可以在8ul的血清中加入392ul樣品稀釋液),混合。注意:血清和質(zhì)控品不能低于4ul。
4) 用移液器將稀釋好的血清和質(zhì)控各50ul加入到相應(yīng)的微孔中。
5) 用封板膠僅在開(kāi)放的微孔表面封板,所有板條的底部是沒(méi)有覆蓋的。
注意:這樣是為了保證溫度的分布在每個(gè)孔的底部和血緣相等地散播。一旦頂部密封阻礙了蒸發(fā),任何多余的封板膠必需被剪掉。
6) 37℃下保濕溫育板條30分鐘,在溫育器的底部放置水浴箱可達(dá)濕潤(rùn)的作用。注意:不要將微孔板疊放,必須單獨(dú)地分層平輔。這對(duì)于溫度的平等分布非常重要。不要使用CO2或任何氣體,不要讓板條接觸任何濕潤(rùn)的物質(zhì),如濕紙巾等。
7) 溫育后,用洗板機(jī)洗板6次,每次每孔300ul。
8) 在每一微孔中加入50ul即用型的酶聯(lián)物。
9) 用封板膠僅在開(kāi)放的微孔表面封板,所有板條的底部是沒(méi)有覆蓋的。(同步驟5)
10) 37℃下保濕溫育板條30分鐘。(同步驟6)
11) 溫育后,用洗板機(jī)洗板6次,每次每孔300ul。
12) 用多道移液器在每一微孔中加入150ul Enwash溶液。
13) 室溫溫育5分鐘。
14) 溫育后,用洗板機(jī)洗板6次,每次每孔300ul。
15) 用多道移液器在每一微孔中加入75ul TMB底物液。
16) 室溫避光溫育10min。
17) 溫育后,用多道移液器在每一微孔中加入50ul終止液,室溫溫育1min。
18) 溫育后,450nm處測(cè) OD值。
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