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超高分辨率熒光顯微鏡

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公司名稱上海捷鈦儀器設(shè)備有限公司
品牌捷鈦儀器
型號Nanoimager
所在地上海市
廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
更新時間2024/9/9 17:14:06
訪問次數(shù)354

產(chǎn)品標(biāo)簽:

超高分辨率熒光顯微鏡熒光顯微鏡超高分辨率

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　　KTIMES TECHNOLOGY LTD,.

　　KTIMES 成立于2011年，捷鈦儀器成立于2015年，

　　ISO14001認(rèn)證（中\(zhòng)英文雙證），ISO45001認(rèn)證（中\(zhòng)英文雙證），歐洲（意大利）CE雙指令質(zhì)量認(rèn)證

　　服務(wù)點包含：成都，長春，廣州，安慶，上海金山，上海奉賢（滬南服務(wù)中心）

　　從事化學(xué)分析，生命科學(xué)，生物制藥，化學(xué)制藥，材料物理等領(lǐng)域?qū)I(yè)設(shè)備的銷售、制造。

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Nanoimager技術(shù)原理
Nanoimager采用PALM/dSTORM技術(shù)，利用單分子定位算法并結(jié)合光學(xué)系統(tǒng)艾里斑的形狀，以超高精度（納米量級）獲得熒光分子的中心位置，然后用CCD將其信號進(jìn)行采集轉(zhuǎn)化得到分辨率為20nm的超分辨圖像。

超高分辨率熒光顯微鏡產(chǎn)品信息

超高分辨率熒光顯微鏡

成像模式

相對于普通的Epifluorescence(EPI)/模式，Nanoimager有total internal reflection fluorescence (TIRF)/ highly inclined and laminated optical sheet (HILO)兩種模式可自由切換。

EPI：激發(fā)較厚的樣品（＞10um），信號噪聲強(qiáng)，即傳統(tǒng)模式。

TRIF：激發(fā)薄層樣品（＜200nm），信號噪聲弱，適用于膜表面成像。

HILO：激發(fā)樣品厚度（＜10um），信號噪聲較弱，適用于大部分成像。

應(yīng)用領(lǐng)域

單分子示蹤	單分子成像	蛋白質(zhì)相互作用
蛋白質(zhì)組裝	表觀遺傳學(xué)	DNA納米定位
單分子定位	單分子FRET	外泌體

應(yīng)用案例

1、單分子FRET

Nanoimager是目前*臺用于大視野單分子熒光共振能量轉(zhuǎn)移(smFRET)的商業(yè)化儀器。 FRET是一種兩個熒光分子間非輻射性的能量轉(zhuǎn)移方式，反映兩者的分子間距。 FRET一般在2 – 10 nm的間距發(fā)生。 smFRET研究中，作為供體的熒光分子由激光激發(fā)，將能量轉(zhuǎn)移至臨近的受體熒光分子。被激發(fā)的受體將能量以熒光形式發(fā)散。供體與受體可以連接至同一個或者不同的分子。

smFRET可以用于測量核酸或者單個蛋白分子的分子內(nèi)距離，也可以用于研究蛋白亞基間的相互作用；還可應(yīng)用于研究藥物對于酶結(jié)合位點的構(gòu)象動力學(xué)的作用，或是神經(jīng)退行性疾病中蛋白的聚集。 smFRET可以用于在單分子層面推到結(jié)合常數(shù)、反應(yīng)途徑與停滯時間而不受總體平均值干擾。

Nanoimager適用于smFRET的關(guān)鍵功能包括：同時雙色成像；單分子散射光強(qiáng)度和總體平均的實時分析；視野中數(shù)千個單分子的高通量成像，以及用交替熒光激發(fā) (ALEX) smFRET的功能來定量化學(xué)計量與FRET效率。圖4是smFRET用于研究單個DNA霍利迪交叉的動力學(xué)。

用smFRET檢測霍利迪交叉(HJs)的實時構(gòu)象變化

2、單分子示蹤

Nanoimager可以在兩個通道同時示蹤細(xì)胞或者純化物樣品中的單分子 (圖5)，并計算擴(kuò)散系數(shù)。細(xì)胞中分子的擴(kuò)散系數(shù)可以被示蹤，如酶或蛋白可以通過藥物和抗生素的反應(yīng)來示蹤。低擴(kuò)散率可以表示標(biāo)記分子與另一分子或結(jié)構(gòu)的相互作用或相結(jié)合。同時示蹤兩種標(biāo)記了不同熒光分子的分子可以確定兩者動態(tài)相互作用的水平。

Nanoimager可以直接反映純化樣品中熒光粒子的擴(kuò)散率和預(yù)估大小，具有敏感性 (單熒光分子級別) 和特異性 (雙色標(biāo)記可以顯著降低檢測雜質(zhì)的可能性)。

Nanoimager雙色追蹤單分子/粒子

3、使用Nanoimager成像—更大的視野

Nanoimager的每個成像通道均有50 µm x 80 µm的大視野，而其他大部分單分子顯微設(shè)備只有20µm x 20 µm的視野。視野中照明均勻，可以實現(xiàn)單分子或細(xì)胞的高通量成像并快速收集數(shù)據(jù)。
下圖顯示了以10倍于其他技術(shù)的速度對突變的大腸桿菌細(xì)胞的不同表型進(jìn)行成像。為了獲得不同表型的可靠的結(jié)果，需要對大量細(xì)胞進(jìn)行比較。使用具有大視野，能夠自動對焦和自動獲取數(shù)據(jù)的Nanoimager可以顯著加快整個實驗速度和通量。將大視野與超分辨成像結(jié)合是Nanoimager的*優(yōu)勢。

超高分辨率熒光顯微鏡

Nanoimager的大視野可以在高分辨率下實現(xiàn)高通量成像

規(guī)格及參數(shù)：

1、數(shù)據(jù)獲取分析：

分辨率橫向分辨率<20nm；縱向分辨率<50nm

成像總數(shù) 可配置4激光

視野每個通道50μm×80μm

獲取速度 100fps/幀

3D成像像散成像

成像速度數(shù)秒～數(shù)分鐘

2、操作參數(shù)：

聚焦模式單次自動對焦/連續(xù)自動聚焦