Axopatch 200B 是 Axon Instruments 膜片鉗放大器的新版本,采用創(chuàng)新的電容器反饋技術(shù)進行單通道記錄,電阻反饋技術(shù)用于全細胞記錄,為單通道和全細胞記錄提供性能-細胞膜片鉗。方便的功能包括 ZAP(在整個電池中破壞貼片)、雙速電流鉗(允許在小電池中更快地鉗位電流)、保持命令(用于在電壓鉗中設(shè)置電壓命令和在電流鉗中設(shè)置電流命令),以及選擇專用電流輸出上的三個增益設(shè)置(用于貼片、全細胞和松散貼片模式)。Axopatch 200B 提供低噪音的單通道錄音。0.13 pA rms (10 kHz) 的驚人低開路噪聲增加到僅 0。當貼片移液器支架連接到探頭輸入端并且移液器電容得到*補償(以消除電容充電瞬態(tài))時,為 145 pA rms。電容反饋技術(shù)的功率如下圖(圖1):室溫下電容反饋明顯優(yōu)于電阻反饋技術(shù);冷卻電容反饋更好!超低噪音錄音領(lǐng)域的成就!
用于人工
雙層實驗的雙層探頭必須在大輸入電容負載下保持穩(wěn)定。Axopatch 200B 是堅如磐石的,輸入電容為 1000 pF。此外,Axopatch 200B 中的集成技術(shù)使雙層電壓能夠非??焖俚夭竭M。有兩個原因。首先,積分器具有固有的大動態(tài)范圍,允許它瞬時通過幾微安的電流。其次,在大指令電壓階躍期間,積分器進入復位狀態(tài)。在這種狀態(tài)下,探頭繼續(xù)作為電壓鉗放大器工作,但反饋電阻非常低。在積分器處于復位狀態(tài)的幾毫秒內(nèi),它可以通過高達 1 mA 的電流為雙層電容快速充電。
全細胞性能
電阻式探頭模式
在全細胞記錄中,細胞和環(huán)境產(chǎn)生的電流噪聲比膜片鉗放大器產(chǎn)生的電流更大。因此,低噪聲電容反饋探頭的優(yōu)勢無法在全細胞模式下得到有效利用。出于這個原因,Axopatch 200B 使用傳統(tǒng)的電阻反饋探頭電子設(shè)備進行膜片鉗記錄的全細胞模式。CV 203BU 探頭包括兩個反饋電阻器,可在全電池模式下提供廣泛的電流通過能力。500 兆歐反饋電阻 (?=1) 提供低噪聲和大電流通過能力 (20 nA)。對于更大的電流,可以切換到 50 兆歐反饋電阻器 (?=0.1) 以傳遞高達 200 nA 的電流。
串聯(lián)電阻補償 串聯(lián)電阻補償
有兩個目標,預測和校正。
串聯(lián)電阻預測
通過瞬時增加指令電壓階躍的大?。ā霸鰤骸保?,使膜電位盡可能快地達到其值。
串聯(lián)電阻校正
為了消除由于電極上的電壓降引起的誤差并提高記錄的帶寬,通過將與測量電流成比例的信號添加到探頭的命令輸入來應用正反饋以增加命令電位。串聯(lián)電阻預測和校正可在 Axopatch 200B 上一起或單獨使用。
雙速電流鉗
Axopatch 200B 采用雙速電流鉗來優(yōu)化速度和穩(wěn)定性。速度的選擇取決于移液器的阻力。對于超過 10 兆歐的移液器電阻,可以使用 I-Clamp FAST 模式在許多實驗條件下獲得 10 µs 的上升時間。I-Clamp NORMAL 模式可確保任何超過 1 兆歐的移液器電阻的穩(wěn)定性。此外,可以使用電流鉗到零電流(I=0 模式),以及較慢的鉗到零電流(跟蹤模式),用于在密封形成之前接近細胞時跟蹤移液器偏移的緩慢變化。此外,Axopatch 200B 包括在電流鉗中的串聯(lián)電阻補償,允許校正由于移液器電阻引起的電壓誤差。
電容反饋膜片鉗
Axopatch 200B 提供低噪聲的膜片鉗放大器技術(shù)。貼片模式下的開路(放大器)噪聲已降至低水平:1 kHz 帶寬以下 < 15 femtoAmps (rms)、5 kHz 帶寬以下 < 60 femtoAmps (rms) 和 10 以下 < 130 femtoAmps (rms) kHz 帶寬,均使用 8 極貝塞爾濾波器測量。安裝了移液器支架后,噪音仍然很低(10 kHz 帶寬以下 145 femtoAmps rms)。這意味著在實際錄音過程中噪音更低;這種噪聲性能部分是通過將探頭內(nèi)部的輸入場效應晶體管冷卻到遠低于 0°C 來實現(xiàn)的。
更好的噪音性能只是故事的一部分。重新設(shè)計的超薄探頭通過使其更容易安裝在顯微鏡下,改善了電極對準備工作的訪問。我們現(xiàn)在在一個探頭中包含兩個全細胞范圍(以前僅在兩個單獨的探頭中可用)。
包括
Axopatch 200B 隨附以下物品:
Axopatch 200B 放大器
CV-203BU 探頭(部件號 1-CV 203BU)
美國電源線(部件號 1-3010-0011)
歐洲電源線,CEE7/7(部件號 1-3010-0013)
附件套件(部件號 1-2050-0301)包含:ACC 保險絲(部件號 1-2050-0014)、用于將探頭連接到機械手的底板(部件號 1-5200-0100)、電極支架(部件號 1-HL-U )、串聯(lián)電阻抖動盒(部件號 1-DR-1)、Patch-1U 型號單元(部件號 1-PATCH-1U)、手冊(部件號 1-2500-0121)
移液器偏移
Axopatch 200B 提供 ±250 mV 的偏移電位。
密封測試
方便的密封測試可用于電壓鉗模式(5 mV 脈沖)或電流鉗模式(50 pA (?=1) 或 500 pA (?=0.1))。
雙指令電位
兩個獨立的指令電位輸入允許您將來自兩個不同來源的指令輸入信號相加。后面板命令被縮放以提供更大的范圍(高達±1V),因此對于電化學測量非常有用。
保持命令
Axopatch 200B 的保持命令比其前代產(chǎn)品有所增強,增加了一個 X1 和 X5 開關(guān),允許您選擇 0 – 200 mV 或 0 -1 V 范圍。當使用來自計算機的外部命令來建立保持電位時,ON/OFF 開關(guān)可以禁用此控制。
移液器電容補償
在電壓鉗或電流鉗模式下操作時,控制兩個時間常數(shù) Fast 和 Slow 的幅度和 tau。
Cell Capacitance Compensation
補償高達 100 pF (?=1) 或 1000 pF (?=0.1) 以允許從大范圍的單元尺寸進行記錄。
輸出增益
可以選擇跨越 1000 倍范圍的十個增益設(shè)置,以將輸出縮放到水平。
泄漏減法
Axopatch 200B 允許您糾正出現(xiàn)的泄漏錯誤,而無需調(diào)整數(shù)據(jù)采集軟件設(shè)置。
低通
濾波器 具有從 1 kHz 到 100kHz 的五種設(shè)置的 4 極貝塞爾濾波器允許您在比以前可用的兩倍范圍內(nèi)設(shè)置適合您應用的帶通。
面板儀表
報告任何操作模式下的電流、電壓或探頭溫度值。報告穩(wěn)態(tài)電流以監(jiān)測電壓鉗輸出。為了評估噪聲,電流顯示為 RMS 值。
Zap
Axopatch 200B 通過在選定的持續(xù)時間內(nèi)施加單個 +1.3V 脈沖來促進貼片破裂。
移液器支架
提供兩個不同長度的 HL-U 支架,可容納 1.0 毫米至 1.7 毫米外徑的移液器。