牛血清的主要成分
牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物，其大部分成分已為人所知，但還有一部分仍不清楚，而且血清的組成及含量通常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而存在差異。
2、多肽類主要是一些促進(jìn)細(xì)胞生長和分裂的生長因子，最主要的生長因子是血小板生長因子，還有成纖維細(xì)胞生長因子、表皮細(xì)胞生長因子、神經(jīng)細(xì)胞生長因子等，雖然在血清中含量很少，但對細(xì)胞的生長和分裂也起著重要作用；
3、激素類激素對細(xì)胞的作用是多方面的。包括：胰島素：促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸，與促細(xì)胞分裂有關(guān)；類胰島素生長因子：能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合，從而有胰島素同樣的作用：促生長激素：促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng)；氫hua：血清中含有微量該成分，它可能具有促細(xì)胞貼附和增殖作用。但有人證明，血清中的氫hua，在細(xì)胞密度較高時可能有抑制細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化的作用。
4、其他成分如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培養(yǎng)基中這些成分的作用并不明顯，與蛋白相結(jié)合的微量元素對細(xì)胞生長起促進(jìn)作用。
1、提供能促使細(xì)胞指數(shù)生長的激素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或含量微小的營養(yǎng)物，以及某些低分子營養(yǎng)物質(zhì)；
2、提供結(jié)合蛋白，識別維生素、脂類、金屬離子，并與有毒金屬和熱源物質(zhì)結(jié)合，起解毒作用；
3、是細(xì)胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源；
4、起酸堿度緩沖液作用；
5、提供蛋白酶抑制劑，細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細(xì)胞不受損傷。
(2)血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4)勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。
(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。
(6)若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。
若溶解后血清有少許沉淀，不要緊張，不會影響血清質(zhì)量，也不會影響細(xì)胞的培養(yǎng)狀態(tài)，如何去掉這些沉淀呢，我們總結(jié)了一下血清沉淀融化“三步曲”。
步：室溫90min或者15-20°C水浴18min。
第二步：20°C水浴25min。
第三步：37°C水浴35min。
如果內(nèi)有頭皮屑絮狀沉淀，說明脂蛋白和纖連蛋白析出，不會影響細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)。
假設(shè)細(xì)胞培養(yǎng)每代傳代時間超過正常傳代時間，有可能細(xì)胞培養(yǎng)過程中受到了污染或致電技術(shù)咨詢。
牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物，其大部分成分已為人所知，但還有一部分仍不清楚，而且血清的組成及含量通常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而存在差異。
牛血清主要成分有以下幾類：
1、蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白（抑制胰蛋白酶的作用）、胎球蛋白（促進(jìn)細(xì)胞附著）、轉(zhuǎn)鐵蛋白（能結(jié)合鐵離子，減少其毒性和被細(xì)胞利用）、纖維粘連素（促進(jìn)細(xì)胞附著生長）等；2、多肽類主要是一些促進(jìn)細(xì)胞生長和分裂的生長因子，最主要的生長因子是血小板生長因子，還有成纖維細(xì)胞生長因子、表皮細(xì)胞生長因子、神經(jīng)細(xì)胞生長因子等，雖然在血清中含量很少，但對細(xì)胞的生長和分裂也起著重要作用；
3、激素類激素對細(xì)胞的作用是多方面的。包括：胰島素：促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸，與促細(xì)胞分裂有關(guān)；類胰島素生長因子：能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合，從而有胰島素同樣的作用：促生長激素：促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng)；氫hua：血清中含有微量該成分，它可能具有促細(xì)胞貼附和增殖作用。但有人證明，血清中的氫hua，在細(xì)胞密度較高時可能有抑制細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化的作用。
4、其他成分如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培養(yǎng)基中這些成分的作用并不明顯，與蛋白相結(jié)合的微量元素對細(xì)胞生長起促進(jìn)作用。
牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)基中的主要功能
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，具有極為重要的功能。1、提供能促使細(xì)胞指數(shù)生長的激素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或含量微小的營養(yǎng)物，以及某些低分子營養(yǎng)物質(zhì)；
2、提供結(jié)合蛋白，識別維生素、脂類、金屬離子，并與有毒金屬和熱源物質(zhì)結(jié)合，起解毒作用；
3、是細(xì)胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源；
4、起酸堿度緩沖液作用；
5、提供蛋白酶抑制劑，細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細(xì)胞不受損傷。
血清儲存和解凍
將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此，推薦在-20℃以下儲存血清，并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)（由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形），再放回冷凍。避免血清產(chǎn)生沉淀
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：
(1)解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍存時，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4)勿將血清置于37℃太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。
(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。
(6)若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。
若溶解后血清有少許沉淀，不要緊張，不會影響血清質(zhì)量，也不會影響細(xì)胞的培養(yǎng)狀態(tài)，如何去掉這些沉淀呢，我們總結(jié)了一下血清沉淀融化“三步曲”。
步：室溫90min或者15-20°C水浴18min。
第二步：20°C水浴25min。
第三步：37°C水浴35min。
如果內(nèi)有頭皮屑絮狀沉淀，說明脂蛋白和纖連蛋白析出，不會影響細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)。
假設(shè)細(xì)胞培養(yǎng)每代傳代時間超過正常傳代時間，有可能細(xì)胞培養(yǎng)過程中受到了污染或致電技術(shù)咨詢。
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