新西蘭馬血清
新西蘭馬血清
作用:
1、提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2、提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4、是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5、起酸堿度緩沖液作用。
6、提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
胎牛血清是品質(zhì)高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分少;牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
GIBCO馬血清16050-122 常見問題:
1、改變培養(yǎng)液的pH值 牛血清的pH理論值為7.0~8.0,培養(yǎng)基在加入規(guī)定量的碳酸氫鈉后(即達(dá)到細(xì)胞生長所需要的滲透壓),再加入10%的牛血清,一般會使培養(yǎng)液的pH值發(fā)生改變。因此在使用過程中應(yīng)注意pH的變化,如有必要可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl調(diào)pH到所需值。
2、由于血清的營養(yǎng)成分豐富,非常適合細(xì)菌、真菌和支原體等生長。國產(chǎn)血清大部分采用手工分裝,因此容易把微生物帶入而使得血清被污染。使用前如果沒有及時(shí)發(fā)現(xiàn),將會把污染物帶入正在培養(yǎng)的細(xì)胞中,而使得細(xì)胞不能正常生長。
3、血清在貯存解凍過程中會產(chǎn)生沉淀,這是由于血清中含有大量脂蛋白、纖維蛋白及多肽類物質(zhì),在-15℃冷凍保存解凍后就會自然形成沉淀,隨著保存時(shí)間的延長,沉淀量會增加。因此在融化血清時(shí)一般應(yīng)先在4℃放置使之解凍,然后放在室溫使血清*融化,以避免沉淀的增加。添加血清時(shí)應(yīng)避免把沉淀加入培養(yǎng)液,否則由于沉淀的存在會使得所培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量黑點(diǎn),或者細(xì)胞表面將會覆蓋一層油狀物質(zhì),影響細(xì)胞的正常生長。為減少血清的損失,可以把有沉淀的血清收集起來進(jìn)行離心處理,將上清液加入培養(yǎng)液使用(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因?yàn)槌恋頃氯麨V膜而無法過濾)。
正確儲存方法:將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長時(shí)間儲存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,*在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)(由于血清結(jié)凍時(shí)體積會增加約10 %, 必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形),再放回冷凍。