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大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)檢測試劑盒操作步驟:
1.包被過程(注意設(shè)置空白對照,陰性對照):
將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當(dāng)濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋或?qū)迤椒旁诘撞坑袧窦啿嫉慕饘贊窈兄?
2.封閉酶標(biāo)反應(yīng)孔:
5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時將封閉液加滿各反應(yīng)孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結(jié)束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
洗滌方法:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動,吸干孔內(nèi)液,傾去液體后在吸水紙上拍干
洗滌次數(shù)3次
3.加入待檢測樣品(建立合適的濃度梯度):
檢測時一般采用1:50-1:400的稀釋度,應(yīng)采用較大稀釋體積進(jìn)行,一般保證樣品吸取量>20μl.
將稀釋好的樣品加入酶標(biāo)反應(yīng)孔中,每樣品少加雙孔,每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)檢測試劑盒4.加入酶標(biāo)抗體:
酶標(biāo)抗體:根據(jù)酶結(jié)合物提供商提供的參考工作稀釋度進(jìn)行.37℃,30-60min之間.短于30min往往結(jié)果不穩(wěn)定.每孔加100μl.洗滌同前.
5.加入底物液(現(xiàn)用現(xiàn)配):
*TMB-過氧化氫尿素溶液,OPD-過氧化氫底物液系統(tǒng)次之.
底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分鐘,加入終止液顯色.
6.終止反應(yīng):
每孔加入終止液50μl終止反應(yīng),于20min內(nèi)測定實(shí)驗(yàn)結(jié)果.
7.結(jié)果判斷:
大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)檢測試劑盒OPD顯色后采用492nm波長,TMB反應(yīng)產(chǎn)物檢測需要450nm波長.檢測時一定要首先進(jìn)行空白孔系統(tǒng)調(diào)零.用測定標(biāo)本孔的吸收值與一組陰性標(biāo)本測定孔平均值的比值(P/N)表示,當(dāng)P/N大于2時作為抗體的效價.(數(shù)值的大小依具體檢測要求而定.)人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)檢測試劑盒
人血清總補(bǔ)體(CH50)檢測試劑盒
人過敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)檢測試劑盒
人補(bǔ)體片斷5a(C5a)檢測試劑盒
人補(bǔ)體片斷3a(C3a)檢測試劑盒
人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)檢測試劑盒
人凝血因子Ⅸ(FⅨ)檢測試劑盒
人凝血因子Ⅹ(FⅩ)檢測試劑盒
人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)檢測試劑盒
人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)檢測試劑盒
人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)檢測試劑盒
人抗凝血酶受體(ATR)檢測試劑盒
人凝血酶受體(TR)檢測試劑盒
人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)檢測試劑盒
人血纖蛋白原(Fbg)檢測試劑盒
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)檢測試劑盒
人抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)檢測試劑盒
人血栓前體蛋白(TpP)檢測試劑盒
人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)檢測試劑盒
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)檢測試劑盒
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)檢測試劑盒
人載脂蛋白A1(apo-A1)檢測試劑盒
人載脂蛋白B100(apo-B100)檢測試劑盒
人白血病抑制因子受體(LIFR)檢測試劑盒
人免疫球蛋白A(IgA)檢測試劑盒
人免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒
人免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒
人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測試劑盒
人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)檢測試劑盒
人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)檢測試劑盒
人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)檢測試劑盒
人血小板衍生生長因子(PDGF)檢測試劑盒
人血小板活化因子(PAF)檢測試劑盒
人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)檢測試劑盒
人組織因子(TF)檢測試劑盒