細菌凍干菌球技術是一種高效的微生物保存方法,能夠在長期保存過程中保持菌種的活性和穩(wěn)定性。以下是細菌凍干菌球凍干的整體解決方案及成功案例見證,展示了該技術的應用和優(yōu)勢。
菌液制備
選擇合適的培養(yǎng)基進行細菌培養(yǎng),確保細菌處于對數(shù)生長期。
收集高濃度的菌體,通過離心分離獲得純凈的菌泥。
使用生理鹽水或特定的緩沖液對菌泥進行洗滌,去除殘留培養(yǎng)基成分。
保護劑選擇與添加
選擇有效的保護劑,如脫脂乳、蔗糖、海藻糖等。海藻糖因其優(yōu)異的保護效果被廣泛應用。
將保護劑與菌泥混合,形成均勻的菌懸液,保護劑濃度應根據(jù)具體菌種進行優(yōu)化。
預凍處理
將菌懸液置于低溫環(huán)境(如-70℃)進行預凍,確保菌體迅速冷凍,形成均勻的冰晶結構。
預凍時間一般為2-4小時,確保菌懸液固化。
冷凍干燥
使用專業(yè)的冷凍干燥設備,在真空環(huán)境下進行干燥處理。
控制升華溫度和時間,確保菌球內部水分充分升華,形成干燥的菌球。
凍干時間一般為20小時左右,具體時間根據(jù)菌球大小和含水量進行調整。
封裝與保存
將凍干后的菌球在真空或惰性氣體環(huán)境下進行封裝,防止外界環(huán)境對菌球的影響。
保存于低溫(如4℃或-20℃)環(huán)境中,確保菌種的長期穩(wěn)定性。
某生物制藥公司采用細菌凍干菌球技術保存一種重要的益生菌菌種。通過優(yōu)化保護劑配方和凍干工藝,成功制備出高質量的凍干菌球。以下是具體案例:
項目背景
該公司需要長期保存一種用于腸道健康的益生菌,要求菌種在保存過程中保持高活性和穩(wěn)定性。
解決方案實施
選用脫脂乳和海藻糖作為保護劑,制備菌懸液。
采用納米材料進行交聯(lián),對菌類進行360度全立體保護。然后再用-196℃,液氮微球成型技術(設備:MS-2T),進行微球定型。
凍干:在-70℃條件下預凍10分鐘,然后使用冷凍干燥機(LYO-20)進行干燥處理,凍干時間為24小時。
凍干后的菌球在真空環(huán)境下進行封裝,保存于4℃冰箱。
效果評估
經(jīng)過一年的保存,凍干菌球的存活率達到95%以上,菌種活性和穩(wěn)定性均滿足生產(chǎn)要求。
在實際應用中,凍干菌球能夠快速復蘇,并保持原有的生理功能。
該案例充分證明了細菌凍干菌球技術在微生物保存中的高效性和可靠性,為生物制藥和微生物研究領域提供了重要的技術支持。
免責聲明