蛋白檢測 考馬斯亮藍(lán)快速染色液產(chǎn)品資料
規(guī)格:500ml
產(chǎn)品名稱:考馬斯亮藍(lán)快速染色液
保質(zhì)期:1年
保存條件:4℃避光
考馬斯亮藍(lán)快速染色液
產(chǎn)品簡介:
考馬斯亮藍(lán)快速染色液(Commassie Blue Fast staining solution)是以考馬斯亮藍(lán)G250為染料可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳膠的快速染色,亦可用于Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測。
BUNSEN本生代理BIOISCO考馬斯亮藍(lán)快速染色液采用BIOISCO自主研發(fā)的技術(shù),在傳統(tǒng)考馬斯亮藍(lán)快速染色液的基礎(chǔ)上進(jìn)行改良,是一種無毒的染色液,快速染色液,可以檢測低達(dá)蛋白電泳條帶。其核心優(yōu)點在于:無需對凝膠進(jìn)行固定,無需煮沸,無需脫色,染色時間短,操作更加簡單。
組成:
產(chǎn)品名稱:PD011-100ml PD011-500ml Storage
考馬斯亮藍(lán)快速染色液:100ml 500ml 4℃,避光
說明書 一份
儲存條件:
4℃,避光,12個月有效。
自備材料:
1、水平搖床或側(cè)擺搖床
2、蒸餾水
3、(可選)加熱裝置
4、20%甘油水溶液
操作步驟(僅供參考):
1、PAGE電泳結(jié)束后取凝膠放入約蒸餾水中,在搖床上搖動,棄液,重復(fù)上述步驟1次。
2、棄蒸餾水,加入Commassie Blue Fast staining solution,使染色液能蓋住凝膠。
3、(可選)凝膠置于考馬斯亮藍(lán)快速染色液中,在水浴鍋或微波爐內(nèi)加熱至95~100℃,立即從加熱裝置中取出。(此步驟可以使染色提高靈敏度或加快染色進(jìn)程,亦可省略。)
4、在搖床上搖動染色,蛋白量大的條帶10~15min左右會出現(xiàn),大部分蛋白條帶會在30~60min左右出現(xiàn)。一般情況下,5h能獲得效果。
5、出現(xiàn)清晰的目標(biāo)蛋白條帶即可停止染色,棄染色液。
6、加入適量的蒸餾水停止染色反應(yīng)。亦可以在搖床上搖動脫色,以便減少背景干擾。
7、把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油水溶液中,長期保存可以制備干膠。
注意事項:
1、PAGE電泳后凝膠采用蒸餾水清洗的目的在于去除凝膠中的SDS等干擾物質(zhì)。如果不能充分去除SDS會導(dǎo)致背景較高。如果凝膠很厚,洗滌時間應(yīng)適當(dāng)延長、洗滌次數(shù)應(yīng)適當(dāng)增加。蒸餾水洗滌去除凝膠中的雜質(zhì)時,如果使用經(jīng)過加熱或沸騰的蒸餾水,每次洗滌時間可以縮短至1~2min。
2、染色時如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當(dāng)加熱,可以大大加快染色速度。但加熱時宜盡量避免沸騰,以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂。
3、如果希望染色的背景更低,希望獲得更加清晰的蛋白條帶,可以加入適量的室溫蒸餾水進(jìn)行洗滌。通過蒸餾水洗滌可以進(jìn)一步降低背景。在4℃蒸餾水中浸泡過夜可以獲得背景更低,條帶更清晰的條帶。在次日對4℃蒸餾水浸泡過夜的已經(jīng)進(jìn)行了染色的凝膠再同前一天一樣進(jìn)行染色和洗滌可以進(jìn)一步改善染色效果,獲得更好的染色蛋白條帶。
4、本染色液呈酸性,有輕微腐蝕性,使用時請作必要防護(hù)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
6、 本產(chǎn)品僅供科研使用,嚴(yán)禁它用。
蛋白檢測 考馬斯亮藍(lán)快速染色液常見問題:
1、無染色條帶:可能上樣量太少,建議電泳時加適當(dāng)量的BSA等作為陽性對照。
2、背景太高:可能雜質(zhì)沒有除盡,建議延長最初的蒸餾水洗滌時間或增加洗滌次數(shù)。也可以在完成染色后,把凝膠放置在蒸餾水中在室溫或4℃進(jìn)行洗滌。在4℃蒸餾水中浸泡過夜,通常可以取得較好的脫色效果。
3、染色條帶的靈敏度不夠理想:可以使用考馬斯亮藍(lán)快速染色液進(jìn)行重復(fù)染色,重復(fù)染色可以改善染色效果。在加熱情況下染色可以顯著提高檢測靈敏度,另外染色后在室溫或4℃用蒸餾水進(jìn)行脫色也可以顯著改善染色的靈敏度。
相關(guān):
名稱:常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒、麗春紅S染色儲存 液(10×Ponceau S)、葡萄糖檢測試劑盒(GOD-POD比色法)。
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