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植物ELISA試劑盒操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
植物ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1.檢測(cè)前,檢查各種儀器,打開(kāi)酶標(biāo)儀,穩(wěn)定20分鐘左右。
2.檢測(cè)樣本要澄清,不能含雜物,否則會(huì)直接影響結(jié)果。
3.實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前要將試劑盒取出,室溫放置30-40分鐘,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使檢測(cè)結(jié)果更為穩(wěn)定。
4.盡量做雙標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn),這樣可以保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
5.底物具有毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,要避免接觸。
6.實(shí)驗(yàn)中,要使底物避光保存,酶標(biāo)板均可拆卸,多余的部分應(yīng)密封好
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