詳細(xì)介紹
斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)抗血管內(nèi)皮損傷性血栓作用【評(píng)價(jià)原理】
普納替尼通過(guò)影響人血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移、血管形成等正常功能而造成血管內(nèi)皮損傷,從而引起血管堵塞,發(fā)生血栓。斑馬魚(yú)心血管系統(tǒng)在分子信號(hào)通路上與人和哺乳動(dòng)物的同源性達(dá)到85%以上,近年來(lái)斑馬魚(yú)廣泛地被用于心血管疾病研究領(lǐng)域,如心力衰竭、血栓、心律失常、心肌病、動(dòng)脈粥樣硬化等。
軀干出現(xiàn)血栓后,回心血量便會(huì)減少,血管直徑將會(huì)減小,血流速度降低,經(jīng)過(guò)血紅細(xì)胞特異性染色(呈紅色),患有血栓的斑馬魚(yú)心臟紅細(xì)胞比正常斑馬魚(yú)心臟紅細(xì)胞明顯減少,由于斑馬魚(yú)血液系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程透明的特點(diǎn),可以明顯被觀察到;利用血管熒光斑馬魚(yú)結(jié)合顯微鏡,可以明顯觀察到患有血栓的斑馬魚(yú)血管直徑減?。焕醚鞣治?,可明顯觀察到患有血栓的斑馬魚(yú)血流速度減慢。
斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)抗血管內(nèi)皮損傷性血栓作用【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成三組,分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用抗血栓藥物組。其中正常對(duì)照組未攝入普納替尼,模型對(duì)照組與服用抗血栓藥物組都攝入了等量的普納替尼(普納替尼通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi))。服用抗血栓藥物組在加入普納替尼的同時(shí)攝入阿司匹林和二十五味珍珠片之類的抗血栓藥物。
服用一段時(shí)間抗血栓藥物后,(1)對(duì)斑馬魚(yú)整體做血紅細(xì)胞特異性染色,觀察血栓發(fā)生情況、心臟紅細(xì)胞信號(hào)強(qiáng)度變化;(2)在熒光顯微鏡下分析斑馬魚(yú)血管直徑變化;(3)在血流分析下觀察斑馬魚(yú)血流速度變化情況。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚(yú)心臟紅細(xì)胞表型圖
黃色虛線區(qū)域?yàn)樾呐K,心臟內(nèi)紅色為紅細(xì)胞
可以看到,服用抗血栓藥物組的心臟紅細(xì)胞數(shù)量與模型對(duì)照組比較明顯增多。
圖2. 斑馬魚(yú)血管直徑表型圖
可以看到,服用抗血栓藥物組的血管直徑與未攝入普納替尼的正常對(duì)照組比較相似,未出現(xiàn)模型對(duì)照組血管直徑顯著減小的情況。
圖3. 斑馬魚(yú)血流速度
與模型對(duì)照組比較,*** p< 0.001
可以看到,服用抗血栓藥物組的血流速度與模型對(duì)照組比較,血流速度顯著加快。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn),服用抗血栓藥物組的與模型對(duì)照組比較,心臟紅細(xì)胞明顯增多、血管直徑明顯增大、血流速度明顯加快。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了a司匹林和er十五味珍珠片具有顯著的抗血栓作用。