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利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)眼毒性

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更新時(shí)間:2022-09-14 13:47:30瀏覽次數(shù):758

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利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)眼毒性【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1. 經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn),保健食品組斑馬魚(yú)眼睛明顯變小,凋亡細(xì)胞明顯增多,眼部血管面積明顯增多,在病理切片中出現(xiàn)較多的凋亡細(xì)胞,表現(xiàn)為細(xì)胞固縮、染色質(zhì)邊集,視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)異常。
2. 本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了保健食品的眼毒性。

詳細(xì)介紹

利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)眼毒性

【評(píng)價(jià)原理】

斑馬魚(yú)胚胎視力發(fā)育迅速,受精后發(fā)育4天的幼魚(yú)就已經(jīng)依賴視覺(jué)線索進(jìn)行捕食和躲避行為。斑馬魚(yú)不僅在角膜、晶狀體、脈絡(luò)膜、視網(wǎng)膜以及血管化和神經(jīng)支配等結(jié)構(gòu)上和人類的眼睛有明顯的相似性,而且還有保守的基因表達(dá)、細(xì)胞構(gòu)成和組織結(jié)構(gòu),因此為研究食品及保健品的眼部毒性提供了一個(gè)模型。

我們?cè)u(píng)價(jià)斑馬魚(yú)眼毒性有4個(gè)指標(biāo):1.眼睛大??;2.眼部細(xì)胞凋亡;3.眼部血管面積;4.眼部病理切片。

【實(shí)驗(yàn)方案】利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)眼毒性

我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成兩組,分別是正常對(duì)照組和供試品組,供試品組(保健食品通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中或灌胃的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi))。

服用一段時(shí)間眼保護(hù)劑后,我們?cè)诮馄曙@微鏡下觀察眼睛大??;整體做凋亡細(xì)胞特異性染色,觀察眼部細(xì)胞凋亡;通過(guò)熒光顯微鏡觀察眼部血管面積,同時(shí)制作成病理切片觀察眼部的病理結(jié)構(gòu)變化。

【結(jié)果展示】

圖1. 斑馬魚(yú)眼睛表型圖

箭頭指示區(qū)域?yàn)檠?/span>

可以看到,保健食品組眼睛相較于正常對(duì)照組明顯減小。

2. 斑馬魚(yú)眼細(xì)胞凋亡表型圖

黃色虛線區(qū)域?yàn)檠?,綠色小點(diǎn)為凋亡細(xì)胞

可以看到,保健食品組的凋亡細(xì)胞較正常對(duì)照組明顯增多。

圖3. 斑馬魚(yú)眼部血管面積

黃色虛線標(biāo)記血管面積

可以看到,保健食品組眼睛血管面積相較于正常對(duì)照組明顯增加。

4. 眼部凋亡細(xì)胞病理切片

可以看到保健食品組出現(xiàn)較多的凋亡細(xì)胞,表現(xiàn)為細(xì)胞固縮、染色質(zhì)邊集,視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)異于正常對(duì)照組

【評(píng)價(jià)結(jié)論】

1. 經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚(yú)的對(duì)比實(shí)驗(yàn),保健食品組斑馬魚(yú)眼睛明顯變小,凋亡細(xì)胞明顯增多,眼部血管面積明顯增多,在病理切片中出現(xiàn)較多的凋亡細(xì)胞表現(xiàn)為細(xì)胞固縮、染色質(zhì)邊集,視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)異。

2. 本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了保健食品的眼毒性。

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