詳細(xì)介紹
利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)對(duì)caspase的誘導(dǎo)作用【評(píng)價(jià)原理】
Caspase家族在細(xì)胞凋亡的調(diào)控上起著重要的作用。Caspase分為三大類:凋亡啟動(dòng)因子、凋亡執(zhí)行因子和炎癥介導(dǎo)因子。凋亡啟動(dòng)因子在級(jí)聯(lián)反應(yīng)的上游,包括(Caspase-8和Caspase-9)等,能識(shí)別和激活下游的Caspase。Caspase-9參與線粒體途徑介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。凋亡執(zhí)行因子在級(jí)聯(lián)反應(yīng)的下游,包括Caspase-3和Caspase-7等,作用于其特異性底物并導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-3是Caspase家族中的,重要的凋亡執(zhí)行者之一,大多數(shù)引發(fā)細(xì)胞凋亡的因素,終均需要通過(guò)caspase-3介導(dǎo)的信號(hào)傳遞途徑,它的活化是凋亡進(jìn)入不可逆階段的標(biāo)志。
我們?cè)u(píng)價(jià)斑馬魚對(duì)caspase的誘導(dǎo)作用有3個(gè)指標(biāo):1.對(duì)caspase 3的誘導(dǎo)作用;2.對(duì)caspase 8的誘導(dǎo)作用;3.對(duì)caspase 9的誘導(dǎo)作用。
利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)對(duì)caspase的誘導(dǎo)作用【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚分成兩組,分別是正常對(duì)照和供服用/注射試品組(供試品通過(guò)溶解到養(yǎng)魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。
服用/注射供試品一段時(shí)間后,利用特異性試劑盒檢測(cè)斑馬魚體內(nèi)caspase的活性。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚caspase3活性
與正常對(duì)照組比較,*** p < 0.001
圖2. 斑馬魚caspase8活性
與正常對(duì)照組比較,*** p < 0.001
圖3. 斑馬魚caspase9活性
與正常對(duì)照組比較,*** p < 0.001
可以看到,服用/注射供試品組與正常對(duì)照組比較caspase活性明顯上升。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn),服用/注射供試品組的斑馬魚caspase活性明顯上升,與正常對(duì)照組存在明顯的差別。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品對(duì)斑馬魚caspase有誘導(dǎo)作用。