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活化 Rac1 Pull-Down 和檢測(cè)試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)Thermo Scientific

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更新時(shí)間：2024-08-17 07:12:12瀏覽次數(shù)：141次

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活化 Rac1 Pull-Down 和檢測(cè)試劑盒

詳細(xì)介紹

Thermo Scientific 活化 Rac1 沉降和檢測(cè)試劑盒是一種全套試劑盒，能夠通過與 Pak1 蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域的特異性蛋白相互作用選擇性地富集和檢測(cè) GTP 結(jié)合 Rac1 GTPase。

活化 Rac1 沉降和檢測(cè)試劑盒包含純化的 GST-Pak1 蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域 (PBD)、瓊脂糖樹脂、陽性和陰性對(duì)照品（分別為 GTPγS 和 GDP）、裂解/結(jié)合/洗滌緩沖液、抗 Rac1 一抗、SDS 樣品緩沖液、離心柱和收集管。該試劑盒使用 NIH3T3 細(xì)胞的裂解物進(jìn)行驗(yàn)證，已知該細(xì)胞系具有穩(wěn)健的 Rac1 活性。

活化 Rac1 沉降和檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)：

?高靈敏度和精確度—優(yōu)化試劑、特異性抗 Rac1 抗體和 Western 印跡程序可確保精確控制和半定量結(jié)果
?經(jīng)驗(yàn)證—對(duì) Rac1 檢測(cè)進(jìn)行功能檢測(cè)，以確保質(zhì)量和性能
?兼容—對(duì)小鼠、大鼠和人來源的多種細(xì)胞類型有效

應(yīng)用：
? 追蹤細(xì)胞分化、遷移、分裂和細(xì)胞骨架重排期間的 Rac1 GTPase 活化
? 研究 Rac1 依賴性板狀偽足形成
? 研究活化 Rac1 在癌癥和血管新生中的作用
? 監(jiān)測(cè)使用生長(zhǎng)因子刺激后的 Rac1 活性
? 篩查小分子抑制劑對(duì) Rac1 活性的影響

使用經(jīng)用于活化內(nèi)源性 Rac1 的 GTPγS 處理的細(xì)胞裂解物相對(duì)于經(jīng)滅活小 GTPase 的 GDP 處理的裂解物，驗(yàn)證了活化 Rac1 沉降和檢測(cè)試劑盒的活化 Rac1 富集方法的功能和特異性。GTPγS 處理捕獲 GTP 結(jié)合活化形式的 Rac1，在存在內(nèi)源性 Rac1 時(shí)產(chǎn)生強(qiáng)烈信號(hào)。GDP 處理使 Rac1 進(jìn)入 GDP 結(jié)合的非活化狀態(tài)，無論 Rac1 蛋白水平如何均幾乎不產(chǎn)生信號(hào)。對(duì)該試劑盒進(jìn)行了優(yōu)化，用于使用 HRP 結(jié)合型二抗（山羊抗小鼠 IgG，產(chǎn)品編號(hào) 31430）和 Thermo Scientific SuperSignal West Pico 化學(xué)發(fā)光底物（產(chǎn)品編號(hào) 34080）進(jìn)行 Western 印跡檢測(cè)。試劑盒所含成分均足夠進(jìn)行 30 次沉降實(shí)驗(yàn)。

Rac1 背景：
Rho 家族 GTPase 具有許多細(xì)胞功能，包括細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的組織。該 GTPase 家族包括 Rho（RhoA、RhoB 和 RhoC）、Rac（Rac1、Rac2、Rac3 和 RhoG）、Cdc42（Cdc42 和 G25K）、Rnd（Rnd1、Rnd2 和 RhoE/Rnd3）、RhoBTB 家族和 Miro 家族。這些 GTPase 通過 GPCR、激酶、細(xì)胞因子和黏附受體實(shí)現(xiàn)從質(zhì)膜到細(xì)胞溶質(zhì)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。通過蛋白羧基末端的香葉酰香葉酰脂質(zhì)修飾來實(shí)現(xiàn)與質(zhì)膜的黏附。Rac1 活化導(dǎo)致肌動(dòng)蛋白聚合，并在細(xì)胞外圍表現(xiàn)為膜皺縮。Rac1 活化也會(huì)導(dǎo)致板狀偽足形成。

Rac1 GTPase 通過激酶、黏附分子或細(xì)胞因子/趨化因子受體在經(jīng)生長(zhǎng)因子（EGF、胰島素、PDGF、NGF）、整合素（纖連蛋白）或化學(xué)引誘物 (fMLP) 刺激后轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)。例如，EGF 刺激導(dǎo)致 PI3 激酶活化，導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞外圍重組（膜皺縮）?；蛘撸ㄟ^ Rac1 的受體激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)導(dǎo)致 MAPK 應(yīng)激反應(yīng)通路 SAPK (JNK) 和 p38 活化。用纖連蛋白刺激細(xì)胞導(dǎo)致整合素介導(dǎo)的細(xì)胞伸展。Rac1 的兩個(gè)主效應(yīng)蛋白是 Pak1 和磷酸肌醇 4-磷酸鹽 5-激酶。Pak1 (p65 Pak) 是一種激活 JNK 通路的激酶，而磷酸肌醇 4-磷酸鹽 5-激酶促進(jìn)肌動(dòng)蛋白絲組裝。Rac 對(duì) T 細(xì)胞發(fā)育和促進(jìn)分化細(xì)胞至關(guān)重要。然而，GTPase 的 Rho 家族可在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)期間發(fā)揮激動(dòng)作用以及在分化期間發(fā)揮拮抗作用。

更多產(chǎn)品數(shù)據(jù)
?通過特異性下游效應(yīng)子測(cè)定小 GTPase 的激活
?在神經(jīng)元細(xì)胞分化過程中檢測(cè)和定位活性 GTPase

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關(guān)鍵詞：對(duì)照品

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