詳細介紹
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Swine Poxvirus(SWPV)PCR |
貨號 | YZP4256 |
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
以下是豬痘病毒PCR檢測試劑盒哪家好的相關(guān)產(chǎn)品:
MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
eECL Western Blot Kit/高靈敏度學(xué)發(fā)光檢測試劑盒250ml25ml、100ml、250ml
產(chǎn)朊假絲酵母 Candida utilis香菇 Lentinula edodes
Li-7(人肝細胞)果形正青霉 Micromonospora violaceofusca
小鼠視網(wǎng)膜muller細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠直腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
菌種保存培養(yǎng)基/Strain Store Medium常用細菌斜面?zhèn)鞔?50克國產(chǎn)/進口
黑曲霉 Aspergillus niger嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus
PC-3M(人前列腺細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠成纖維細胞(EGFP標記)MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞
G-401(人腎Wilms細胞)5×106cells/瓶×2
豬痘病毒PCR檢測試劑盒哪家好葛根素;Puerarin CAS 3681-99-0 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
蝙蝠葛堿 CAS 524-17-4 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
茚威;純品型;標準品;有證書 CAS 144171-61-9 規(guī)格: 0.1g 訂購|咨詢
原兒茶醛 CAS 139-85-5 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
黃芩素;Baicalein CAS 491-67-8 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
異黃腐醇 CAS 70872-29-6 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
銀杏酚酸 CAS 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
貝母素甲 CAS 23496-41-5 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
七葉皂苷鈉 CAS 20977-05-3 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
對葉百部堿 CAS 1818546 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
五味子酯甲;Schisantherin CAS 58546-56-8 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢