殺蠣包拉米蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書

運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對(duì)照時(shí)，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

以下是殺蠣包拉米蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書的相關(guān)產(chǎn)品：

硫酸氫小檗堿 英文名稱：Berberine bisulfate 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

羅通定 英文名稱：Luo Tongding 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光

托品酸N-異丙基去甲托品酯 英文名稱：Tropic acid N- isopropyl go armour tropine ester 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光

地喹銨 英文名稱：Dequalinium chloride 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

丹皮酚磺酸鈉 英文名稱：Sodium Paeonol Sulfonate 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

貝美格 英文名稱：Bemegride 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

β-胡蘿卜素 英文名稱：Beta carotene 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

羥苯丙酯（對(duì)羥基苯丙酯） 英文名稱：Propyl p-hydroxybenzoate (propyl p-hydroxybenzoate) 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

富馬酸異丙吡侖 英文名稱：Isopropiram fumarate 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

奧拉米特 英文名稱：Ola Mitter 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

桂美酸 英文名稱：Cinametic acid 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光

曲匹地爾 英文名稱：The effects of trapidil 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光

曲匹布通 英文名稱：Trepibutone 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光

對(duì)氨基楊酸異煙 英文名稱：Pasiniazid 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

殺蠣包拉米蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書山羊雌激素(E)ELISA Kit  Goat Estrogen,E ELISA Kit

牛促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA Kit  Bovine gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit

人含patatin樣磷脂酶域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)ELISA Kit  Human PNPLA3/ADPN/C22orf20 ELISA kit

人血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA Kit  Human Angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA Kit

小鼠谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA Kit  Mouse Glutamate dehydrogenase,GDH/GLDH ELISA Kit

魚熱休克蛋白HSP90α(HSP90AA1)ELISA Kit  Fish Heat shock protein HSP 90-alpha,HSP90AA1 ELISA kit

雞過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA ELISA Kit  Chicken peroxisome proliferator-activated receptorsγ,PPAR-γ ELISA Kit

大鼠1,25二羥基維生素D3(1,25 DHVD3)ELISA Kit  Rat 1,25-dihydroxyvitamin D3 ELISA Kit

兔子6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)ELISA Kit  Rabbit 6-keto-PGF1α ELISA Kit

人胰島細(xì)胞抗原2抗體/蛋白酪氨酸磷酸酶抗體(IA-2A)ELISA Kit  Human Islet Antigen-2 Antibody,IA-2A ELISA Kit

小鼠細(xì)小病毒(PV)抗體(IgG)ELISA Kit  Mouse parvovirus(PV)antibody(IgG)ELISA kit

豬胱硫醚β合酶(CBS)ELISA Kit  Pig cystathionine-beta-synthase,CBS ELISA kit

人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)ELISA Kit  Human Angiotensin converting enzyme 2,ACE2 ELISA Kit

人N1,N12-二乙?；@ ELISA Kit  Human N1 N12 Diacetylspermin ELISA kit

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。