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公司動(dòng)態(tài)

過(guò)表達(dá)慢病毒包裝服務(wù)實(shí)驗(yàn)技術(shù)

閱讀:2172          發(fā)布時(shí)間:2017-12-25

徠創(chuàng)生物服務(wù)簡(jiǎn)介

慢病毒具有廣泛的感染譜,可以有效感染分lie期和靜止期的細(xì)胞,并且能夠*穩(wěn)定表達(dá)外源基因,因而成為導(dǎo)入外源基因的有力工具?,F(xiàn)在慢病毒系統(tǒng)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用到各種細(xì)胞系的基因過(guò)表達(dá)、基因干擾以及活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中。

服務(wù)內(nèi)容:慢病毒包裝的基因涉及常規(guī)的蛋白編碼基因及非編碼基因,比如:miRNA、lncRNA以及circularRNA等的過(guò)表達(dá)及干擾的慢病毒包裝服務(wù)。

慢病毒包裝服務(wù)價(jià)格與周期

服務(wù)編號(hào)

病毒滴度

規(guī)格

贈(zèng)送陰性對(duì)照

價(jià)格

周期

LC1033

過(guò)表達(dá)慢病毒

過(guò)表達(dá)慢病毒,病毒滴度>10^8PFU/ml

1ml(>10^8PFU/ml)

詢價(jià)

6-8周

LC1034

干擾慢病毒

過(guò)表達(dá)慢病毒,病毒滴度>10^8PFU/ml

1ml(>10^8PFU/ml)

詢價(jià)

6-8周

慢病毒包裝服務(wù)實(shí)驗(yàn)流程

a. 慢病毒過(guò)表達(dá)質(zhì)粒載體的構(gòu)建: 根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)特異性擴(kuò)增引物,采用高保真PCR技術(shù)從模板中調(diào)取目的基因CDS區(qū)連入核心載體。

b. 慢病毒干擾質(zhì)粒載體的構(gòu)建:合成目的基因的siRNA序列,退火成雙鏈,然后連入慢病毒干擾質(zhì)粒載體。

c. 非編碼基因過(guò)載體構(gòu)建:從模板中調(diào)取基因相應(yīng)的miRNA前體, 然后連入慢病毒核心質(zhì)粒(miRNA以基因組為模板,lncRNA和circularRNA根據(jù)需要可以用cDNA或基因組為模板)。

d. 慢病毒載體的包裝與濃縮純化: 核心質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒進(jìn)行高純度無(wú)內(nèi)毒素抽提,共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后8h 更換為*培養(yǎng)基,培養(yǎng)48和72h后,分別收集富含慢病毒顆粒的細(xì)胞上清,病毒上清液通過(guò)超離心濃縮病毒。

服務(wù)流程:

徠創(chuàng)客戶須知

1、適用于在難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中進(jìn)行的基因過(guò)表達(dá)或干擾研究,如原代神經(jīng)細(xì)胞,干細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞等;

2、適用于快速建立穩(wěn)定表達(dá)的特定基因細(xì)胞株;

3、適用于In vivo 實(shí)驗(yàn),包括穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株成瘤實(shí)驗(yàn)、局部注射、活體動(dòng)物的基因過(guò)表達(dá)或干擾等。

徠創(chuàng)生物服務(wù)承諾

提供完整客觀準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

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