上海博麥德生物技術(shù)有限公司
主營產(chǎn)品: 培養(yǎng)基,生物培養(yǎng)基 |
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2013-10-15 閱讀(683)
本試劑僅供研究使用
試驗(yàn)原理:
FA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知FA濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將FA和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中FA的濃度呈比例關(guān)系。
試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存)
96孔配置
48孔配置
配制
96/48人份酶標(biāo)板
1塊板(96T)
半塊板(48T)
即用型
塑料膜板蓋
1塊
半塊
即用型
標(biāo)準(zhǔn)品:80ng/ml
1瓶(0.6ml)
1瓶(0.3ml)
按說明書進(jìn)行稀稀
空白對照
1瓶(1.0ml)
1瓶(0.5ml)
即用型
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液
1瓶(4.0ml)
1瓶(2.0ml)
即用型
生物素標(biāo)記的抗FA抗體
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
親和鏈酶素-HRP
1瓶(8.0ml)
1瓶(4.0ml)
即用型
洗滌緩沖液
1瓶(20ml)
1瓶(10ml)
按說明書進(jìn)行稀釋
底物A
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
底物B
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
終止液
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
標(biāo)本稀釋液
1瓶(12ml)
1瓶(6.0ml)
即用型
自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
80 ng/ml
(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
40 ng/ml
(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
20 ng/ml
(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10 ng/ml
(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5.0 ng/ml
(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5 ng/ml
(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0 ng/ml
(空白對照)
原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
建議使用的實(shí)驗(yàn)方案
標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml)
A
80
80
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
B
40
40
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
C
20
20
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
D
10
10
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
E
5.0
5.0
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
F
2.5
2.5
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
G
0
0
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
H
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的FA標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的FA含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測值范圍:0-80ng/ml
4、敏感度: 0.1 ng/ml
le6?Oml??% P/ang=EN-US style='color:black'>4、敏感度: 0.01 ng/ml
小鼠雌激素(E)ELISA試劑盒 Mouse estrogen,E ELISA試劑盒
小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 Mouse Cyclin-D1 ELISA試劑盒
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Mouse myelin basic protein,MBP ELISA試劑盒
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒 Mouse transforming growth factor α,TGF-α ELISA試劑盒
小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒 Mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA試劑盒
小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒 Mouse Prostatic Acid Phosphatase,PAP ELISA試劑盒
小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 Mouse prostate specific antigen,PSA ELISA試劑盒
小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒 Mouse ovarian cancer marker-CA125 ELISA試劑盒
小鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒 Mouse mammary carcinoma Marker-CA153 ELISA試劑盒
小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒 Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA試劑盒
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒 Mouse heme oxygenase 1,HO-1 ELISA試劑盒
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒 Mouse Phospholipidase A2,PL-A2 ELISA試劑盒
小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒 Mouse Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒 Mouse Aquaporin 5,AQP-5 ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒 Mouse Aquaporin 4,AQP-4 ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒 Mouse Aquaporin 3,AQP-3 ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒 Mouse Aquaporin 1,AQP-1 ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒 Mouse Aquaporin 0,AQP-0 ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒 Mouse Aquaporin 2,AQP-2 ELISA試劑盒
小鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒 Mouse Thyroglobulin,TG ELISA試劑盒
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 Mouse Inhibin,INH-A ELISA試劑盒
小鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒 Mouse Chorionic Gonadotrophin β,β-CG ELISA試劑盒
小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒 Mouse sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA試劑盒
小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒 Mouse Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISA試劑盒
小鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒 Mouse Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA試劑盒
小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 Mouse High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA試劑盒
小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒 Mouse Endothelial lipase,EL ELISA試劑盒
小鼠碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒 Mouse carbonic anhydrase,CA ELISA試劑盒
小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒 Mouse calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA試劑盒
小鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒 Mouse Motilin,MTL ELISA試劑盒
小鼠生長抑素(SS)ELISA試劑盒 Mouse Somatostatin,SS ELISA試劑盒
小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 Mouse Fibrinogen,Fbg ELISA試劑盒
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 Mouse plaet activating factor,PAF ELISA試劑盒
小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α)ELISA試劑盒 Mouse skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA試劑盒
小鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒 Mouse Myosin,MYS ELISA試劑盒
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA試劑盒 Mouse major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA試劑盒
小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒 Mouse GATA binding protein 4,GATA4 ELISA試劑盒
小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 Mouse interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA試劑盒
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA試劑盒
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 Mouse Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA試劑盒
小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒 Mouse neuropeptide Y,NP-Y ELISA試劑盒
小鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 Mouse Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA試劑盒
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒 Mouse Gelsolin ELISA試劑盒
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA試劑盒
小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒 Mouse thrombus precursor protein,TpP ELISA試劑盒
小鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒 Mouse gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA試劑盒
小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒 Mouse inhibin B,INH-B ELISA試劑盒
小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒 Mouse thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISA試劑盒
小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒 Mouse corticotropin releasing hormone,CRH ELISA試劑盒
小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒 Mouse Insulin Receptor β,ISR-β ELISA試劑盒
小鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒 Mouse Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA試劑盒
小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒 Mouse lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA試劑盒
小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒 Mouse soluble plaet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA試劑盒
小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 Mouse Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA試劑盒
小鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 Mouse Hyaluronic acid,HA ELISA試劑盒
小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒 Mouse ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA試劑盒
小鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒 Mouse Cholecystokinin,CCK ELISA試劑盒
小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒 Mouse brain-gut peptides,BGP/Gehrelin ELISA試劑盒
小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒 Mouse 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA試劑盒
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 Mouse apoprotein,apo-A1 ELISA試劑盒
小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 Mouse apoprotein B100,apo-B100 ELISA試劑盒
小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA試劑盒
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA試劑盒
小鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒 Mouse Vitamin C,VC ELISA試劑盒
小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒 Mouse Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA試劑盒
小鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒 Mouse Vitamin B6,VB6 ELISA試劑盒
小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ) ELISA試劑盒 Mouse Collagen Type Ⅰ,Col ⅠELISA試劑盒
小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒 Mouse Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA試劑盒
小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒 Mouse soluble P-selectin,sP-selectin ELISA試劑盒