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異丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 IPTG

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地懷化市

聯(lián)系方式:楊陽查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2023-12-18 10:45:50瀏覽次數(shù):213次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:1條

所在地區(qū):湖南懷化市

聯(lián)系人:楊陽 (銷售經(jīng)理)

產(chǎn)品簡介
CAS號(hào) 367-93-1 產(chǎn)地 國產(chǎn)
級(jí)別 其他    

異丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 IPTG常用于需要誘導(dǎo) β-半乳糖苷酶活性的克隆實(shí)驗(yàn)。它常與 X-Gal 或 Bluo-Gal 結(jié)合使用,用于重組細(xì)菌菌落的藍(lán)白篩選,這些菌落可以誘導(dǎo) lac 操縱子在大腸桿菌中的表達(dá)。IPTG 與 lacI 阻遏蛋白結(jié)合并改變其構(gòu)象而發(fā)揮作用,防止 β-半乳糖苷酶編碼基因 lacZ 的抑制。

詳細(xì)介紹

丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用強(qiáng)的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定,因此被實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用。異丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 IPTG常用于需要誘導(dǎo) β-半乳糖苷酶活性的克隆實(shí)驗(yàn)。它常與 X-Gal 或 Bluo-Gal 結(jié)合使用,用于重組細(xì)菌菌落的藍(lán)白篩選,這些菌落可以誘導(dǎo) lac 操縱子在大腸桿菌中的表達(dá)。異丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷 IPTG 與 lacI 阻遏蛋白結(jié)合并改變其構(gòu)象而發(fā)揮作用,防止 β-半乳糖苷酶編碼基因 lacZ 的抑制。

誘導(dǎo)原理:

(1)在原核蛋白表達(dá)體系中,如 E.coli的乳糖操縱子(元)含Z、Y及A三個(gè)結(jié)構(gòu)基因,分別編碼半乳糖苷酶、滲透酶和乙酰基轉(zhuǎn)移酶,此外還有一個(gè)操縱序列O、一個(gè)啟動(dòng)序列P及一個(gè)調(diào)控基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白(Lac阻遏物,不屬于乳糖操縱子),后者與O序列結(jié)合,使操縱子(元)受阻遏而處于關(guān)閉狀態(tài)。在啟動(dòng)序列P上游還有一個(gè)分解(代謝)物基因激活蛋白(CAP)結(jié)合位點(diǎn)。由P序列、O序列和CAP結(jié)合位點(diǎn)共同構(gòu)成lac操縱子的調(diào)控區(qū),三個(gè)酶的編碼基因即由同一調(diào)控區(qū)調(diào)節(jié),實(shí)現(xiàn)基因產(chǎn)物的協(xié)調(diào)表達(dá) 。

(2)Lac 阻遏物是一種具有 4 個(gè)相同亞基的四級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白,都有一個(gè)與誘導(dǎo)劑結(jié)合的位點(diǎn)。 在沒有乳糖存在時(shí),Lac操縱子(元)處于阻遏狀態(tài)。此時(shí),I序列在PI啟動(dòng)序列操縱下表達(dá)的Lac阻遏蛋白與O序列結(jié)合,阻礙RNA聚合酶與P序列結(jié)合,抑制轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)。當(dāng)有乳糖存在時(shí),Lac操縱子(元)即可被誘導(dǎo)。在這個(gè)操縱子(元)體系中,真正的誘導(dǎo)劑并非乳糖本身。乳糖進(jìn)入細(xì)胞,經(jīng)β-半乳糖苷酶催化,轉(zhuǎn)變?yōu)榘肴樘恰瓷砩系恼T導(dǎo)劑。后者作為一種誘導(dǎo)劑分子結(jié)合阻遏蛋白,使蛋白構(gòu)象變化,導(dǎo)致阻遏蛋白與O序列解離、RNA 聚合酶不再受阻礙,啟動(dòng)子P 開始發(fā)生轉(zhuǎn)錄,啟動(dòng)反應(yīng)開始發(fā)生轉(zhuǎn)錄。




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