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技術(shù)文章

Dispase® II

發(fā)布時(shí)間:2017-8-9

產(chǎn)品描述

Dispase 中文名稱為中性蛋白酶,也稱為分散酶,是一種非特異性的金屬蛋白酶,被用來從各種不同組織或器官中消化細(xì)胞外基質(zhì),釋放并制備原代單細(xì)胞;或用于細(xì)胞培養(yǎng)中的細(xì)胞收獲或接種轉(zhuǎn)移;也被用于防止懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的細(xì)胞意外結(jié)團(tuán)。

蛋白水解酶類,如胰蛋白酶、膠原酶和鏈酶蛋白酶都被用語來分散組織、分類細(xì)胞,但他們常傷害細(xì)胞,并且在培養(yǎng)時(shí)不穩(wěn)定,甚至可能引入支原體污染。 Dispase 就沒有這個(gè)問題,不會(huì)給細(xì)胞膜帶來傷害,而且因?yàn)槠鋪碜约?xì)菌,故不會(huì)引入支原體或任何動(dòng)物病毒;溫度、 pH 、血清成分等的差異對(duì) Dispase 影響很小。 Dispase 經(jīng)稀釋后其活性就大大降低,這也方便了后續(xù)的培養(yǎng)。 Dispase 甚至被加入細(xì)胞培養(yǎng)懸液中用于防止細(xì)胞團(tuán)結(jié)。

 

勢:

該酶已被證實(shí)作用迅速有效又溫和;

細(xì)胞能保持完整,細(xì)胞膜無損;

該酶非哺乳動(dòng)物來源,不含支原體或動(dòng)物病毒污染;

對(duì)于溫度、 pH 的改變、以及血清成分都很穩(wěn)定;

使用螯合劑或稀釋就能簡單滅活;

酶編號(hào): EC 3.4.24.4

酶活定義:

1U 是在檢測條件下 1 分釋放相當(dāng)于 1 umol 酪氨酸的 Folin 陽性氨基酸或肽的酶量; DispaseII  ≥0.8 U/mg (37oC ,使用酪蛋白作為底物, pH 7.5) ; 1U Dispase II 基本相當(dāng)于 600U 日本單位的 Dispase 。

抑制劑:  EDTA 、 EGTA  Hg2+ 、其他重金屬。血清不會(huì)抑制酶活性。

使用方法:

 Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl) 溶解 Dispase  10 mg/ml ,使用時(shí)用細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋到 0.6-2.4 U/ml 。不推薦高于 2.4 U/ml    工作濃度,可用 0.22 um 的無菌濾膜過濾除菌。

保存于運(yùn)輸說明:

保存在 +2 ° ~+8 °;配成溶液后,在 +2 ° ~+8 ° 2 周內(nèi)使用有效,在 -20 ° 2 個(gè)月內(nèi)使用有效;不要反復(fù)凍融;儲(chǔ)存液用 Hepes 鹽緩沖液稀釋后, +2 ° ~+8 °, 3 天內(nèi)使用有效。

按照 Roche 提供的條件保存和運(yùn)輸

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