詳細(xì)介紹
產(chǎn)品介紹:
Oroboros O2k是目前國(guó)際認(rèn)可度很高的一款細(xì)胞能量代謝測(cè)量/分析產(chǎn)品。
O2k系統(tǒng)通過(guò)高分辨率的極譜氧電極和全功能的熒光技術(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本的線粒體呼吸功能以及生物體的能量代謝進(jìn)行精準(zhǔn)定量及分析。
O2k其應(yīng)用范圍幾乎涉及所有與細(xì)胞或線粒體能量代謝相關(guān)的領(lǐng)域。
多功能參數(shù)檢測(cè):可同時(shí)檢測(cè)耗氧率、呼吸速率、呼吸控制比率、PH值、膜電位、離子濃度、自由基、ROS、ATP、Ca2+、NO。
多種樣品適用:可用于直接測(cè)量線粒體、細(xì)胞、組織器官,或者細(xì)菌、植物細(xì)胞等。
Oroboros O2K技術(shù)優(yōu)勢(shì)
高精度電極檢測(cè)方法
實(shí)驗(yàn)使用試劑開(kāi)放,無(wú)實(shí)驗(yàn)耗材消耗
封閉性檢測(cè)環(huán)境,可進(jìn)行低氧/常氧/高氧實(shí)驗(yàn)
擁有加熱/制冷模塊,可實(shí)現(xiàn)電子控溫,溫度精度高
精準(zhǔn)定量檢測(cè)方式,直接檢測(cè)樣本消耗O2的含量
具有攪拌系統(tǒng)的檢測(cè)腔,確保腔室內(nèi)樣本溶液均勻,可提高檢測(cè)樣本的準(zhǔn)確性和實(shí)驗(yàn)重復(fù)性
性能特點(diǎn):
雙通道系統(tǒng)
測(cè)量樣本容量1.5ml-3.5ml
溫度范圍:4-47℃,可進(jìn)行低溫試驗(yàn)
具有可變速的磁力攪拌功能
極譜氧電極傳感器,檢測(cè)氧流量分辨率為1 pmol O2?s-1?ml-1
熒光檢測(cè)單元:雙通道/四通道。
熒光檢測(cè)參數(shù)包括:線粒體膜電位、H2O2、ATP、Ca2+、ROS、自由基。
樣品腔為杜蘭玻璃、鈦金屬等極低活性的材質(zhì),降低背景氧干擾。
同步顯示流動(dòng)氧的濃度;自動(dòng)進(jìn)行氧信號(hào)的校正。
雙通道,具有注射和回抽的功能,自動(dòng)化控制,可在軟件的編程下進(jìn)行定時(shí)、定量的精準(zhǔn)加樣,不限制加樣次數(shù)。
專(zhuān)用組織勻漿工具,采用勻漿管技術(shù)對(duì)樣本進(jìn)行研磨,樣本需求量少至幾毫克。
可自由設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)時(shí)的加入不同的底物、抑制劑等化合物去改變線粒體的呼吸,最多可以加入20多種。
強(qiáng)大的DatLab軟件功能:可實(shí)時(shí)顯示并記錄所有測(cè)量參數(shù);可在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中隨時(shí)更改實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì);可自動(dòng)進(jìn)行氧氣等參數(shù)的校準(zhǔn);具有Protocol編程功能,支持客戶(hù)自定義編程以便重復(fù)實(shí)驗(yàn),同時(shí)廠家提供多種Protocol程序,方便客戶(hù)選用。
應(yīng)用案例1:
實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑樘骄坎煌瑵舛冉怦盥?lián)劑FCCP對(duì)細(xì)胞氧耗率OCR的影響。
細(xì)胞經(jīng)氧化磷酸化抑制劑寡酶素處理后,細(xì)胞的耗氧率顯著降低,使細(xì)胞呼吸達(dá)到Leak水平。
實(shí)驗(yàn)第30分鐘開(kāi)始加入0.5uM FCCP,并每間隔120秒逐量增加0.5uM.
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果顯示,隨著FCCP濃度的不斷增加,細(xì)胞耗氧量呈現(xiàn)顯著增加,并且在FCCP濃度加入劑量為5.5uM時(shí)達(dá)到值,
而再增加濃度并不會(huì)使細(xì)胞耗氧率出現(xiàn)顯著增加,這表明FCCP的濃度為5.5uM。
應(yīng)用案例2:
實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑榱私饧?xì)胞的能量代謝機(jī)制。
實(shí)驗(yàn)樣本為不同量的人類(lèi)股外側(cè)肌組織,將樣本A 3.4mgWw組織與樣本B 2.8mgWw 組織分別置于雙通道的細(xì)胞代謝測(cè)量分析系統(tǒng)中,并分別加入蘋(píng)果酸、辛酰肉堿、ADP、、琥珀酸、魚(yú)藤酮、丙二酸、粘噻唑、以及抗霉素等,觀察細(xì)胞的耗氧情況。紅色曲線為樣本A,綠色曲線為樣本B,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示不同量樣本加入相同劑量的藥物后耗氧率基本相同。
應(yīng)用案例3:
測(cè)量細(xì)胞為小鼠骨髓癌細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)中使用TIP 2k微型滴定泵加入解耦聯(lián)劑FCCP,實(shí)驗(yàn)設(shè)定滴定間隔120秒,循環(huán)滴定15次,每次逐量增加0.5uM,加藥濃度從0.5uM-7.5uM。耗氧率隨解耦聯(lián)劑FCCP的不同濃度的變化而不同;O2含量逐步下降。
應(yīng)用案例4:
實(shí)驗(yàn)為測(cè)量小鼠心肌細(xì)胞的耗氧率與H2O2之間的相互作用。實(shí)驗(yàn)中分別添加活性氧、琥珀酸鹽、、ADP、寡霉素、FCCP以及細(xì)胞色素C,實(shí)驗(yàn)設(shè)置為不同實(shí)驗(yàn)樣本中加入藥物的劑量相同,但順序不同,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示不同的藥物添加順序?qū)?xì)胞代謝、氧化磷酸化過(guò)程產(chǎn)生了不同的影響。(藍(lán)色曲線為氧含量;紅色為耗氧量變化曲線;綠色為H2O2變化曲線。)