CAS號	3520-43-2	產(chǎn)地	國產(chǎn)
規(guī)格	1mg	級別	化工級
證書	ISO系列證書

JC-1 (Synonyms: CBIC2)

JC-1 (CBIC2) 是一種廣用于檢測線粒體膜電位的理想熒光探針。JC-1 染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi)，可以用來檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi)，JC-1 聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物，聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光 (Ex=585 nm, Em=590 nm) ；在線粒體膜電位較低時(shí)，JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中，產(chǎn)生綠色熒光 (Ex=514 nm, Em=529 nm) 。

生物活性

JC-1 (CBIC2) is an ideal fluorescent probe widely used to detect mitochondrial membrane potential. JC-1 accumulates in mitochondria in a potential dependent manner and can be used to detect the membrane potential of cells, tissues or purified mitochondria. In normal mitochondria, JC-1 aggregates in the mitochondrial matrix to form a polymer, which emits strong red fluorescence (Ex=585nm, Em=590nm); When the mitochondrial membrane potential is low, JC-1 cannot aggregate in the matrix of mitochondria and produce green fluorescence (ex=514nm, em=529nm)^[1].

體外研究(In Vitro)

JC-1?染色液的配制
1.1?制備儲存液
用?DMSO?配制?5 mg/mL?的?JC-1。如用?1 mL DMSO?溶解?5 mg JC-1。
注：1) JC-1?儲存液建議分裝后于?-20℃?或?-80℃?避光保存。
1.2?工作液的配制
用預(yù)熱好的無血清細(xì)胞培養(yǎng)基或?PBS?稀釋儲存液，配制成?1-20 μg/mL?的?JC-1?工作液。
注：1)?請根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整?JC-1?工作液濃度，且現(xiàn)用現(xiàn)配。
2)?如果?JC-1?進(jìn)入細(xì)胞的效果不好，可向工作也液中加入適量?20% Pluronic F127?溶液，終濃度為?0.02-0.05%，Pluronic F127?可以防止?JC-1?在緩沖液中聚合并幫助其進(jìn)入細(xì)胞。
JC-1染色
1)?以6孔板為例進(jìn)行細(xì)胞鋪板，密度為?5×10⁵ cells/mL。37℃，5% CO₂?培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注：進(jìn)行凋亡誘導(dǎo)時(shí)的細(xì)胞密度建議不超過?1×10⁶/mL，也可根據(jù)自己的細(xì)胞類型培養(yǎng)至合適的密度。
2)?取?0.5 mL?細(xì)胞懸液至無菌的離心管內(nèi)。
3) 400 g?離心?3-5 min；棄上清。?
4)?用?1 mL JC-1?工作液重懸細(xì)胞，于?37℃，5% CO₂?培養(yǎng)箱孵育?15-30 min。
5)?室溫條件?400 g?離心?5 min；吸掉上清。
6)?用?2 mL?細(xì)胞培養(yǎng)液或者緩沖液重懸細(xì)胞，之后室溫條件?400 g?離心?5 min；棄上清，重復(fù)兩次。
7)?用?1 mL?新鮮培養(yǎng)液或者緩沖液重懸細(xì)胞，立刻進(jìn)行后續(xù)的流式分析或熒光顯微鏡觀察。
8)?數(shù)據(jù)分析?(流式細(xì)胞儀)?：含有紅色?JC-1?聚集物的健康細(xì)胞線粒體用?FL2?通道檢測；含有綠色?JC-1?單體的凋亡或不健康細(xì)胞用?FL1 (FITC)?通道檢測。
注：若用于酶標(biāo)儀檢測，用?300 μL?緩沖液重懸細(xì)胞；然后按照每孔?100 μL?的量將染色好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到不透光的?96?孔板內(nèi)，即可進(jìn)行熒光酶標(biāo)板分析。

分子量：652.23

性狀：Solid

Formula：C₂₅H₂₇Cl₄IN₄

CAS 號：3520-43-2

運(yùn)輸條件：Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

儲存方式

4°C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

溶解性數(shù)據(jù)

In Vitro:

DMSO : 5 mg/mL (7.67 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C)

H₂O : < 0.1 mg/mL (insoluble)

配制儲備液

濃度溶劑體積質(zhì)量	1 mg	5 mg	10 mg

1 mM	1.5332 mL	7.6660 mL	15.3320 mL
5 mM	0.3066 mL	1.5332 mL	3.0664 mL
10 mM	---	---	---

請根據(jù)產(chǎn)品在不同溶劑中的溶解度選擇合適的溶劑配制儲備液；一旦配成溶液，請分裝保存，避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。
儲備液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C 儲存時(shí)，請?jiān)?6 個(gè)月內(nèi)使用，-20°C 儲存時(shí)，請?jiān)?1 個(gè)月內(nèi)使用。

In Vivo:

以下溶解方案都請先按照 In Vitro 方式配制澄清的儲備液，再依次添加助溶劑：

——為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，澄清的儲備液可以根據(jù)儲存條件，適當(dāng)保存；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的工作液，建議您現(xiàn)用現(xiàn)配，當(dāng)天使用；以下溶劑前顯示的百
分比是指該溶劑在您配制終溶液中的體積占比；如在配制過程中出現(xiàn)沉淀、析出現(xiàn)象，可以通過加熱和/或超聲的方式助溶

1.

請依序添加每種溶劑： 10% DMSO 40% PEG300 5% Tween-80 45% saline
Solubility: 1.25 mg/mL (1.92 mM); Suspended solution; Need ultrasonic
2.

請依序添加每種溶劑： 10% DMSO 90% (20% SBE-β-CD in saline)
Solubility: 1.25 mg/mL (1.92 mM); Suspended solution; Need ultrasonic

參考文獻(xiàn)

[1]. A Perelman, et al. JC-1: alternative excitation wavelengths facilitate mitochondrial membrane potential cytometry. Cell Death Dis. 2012 Nov 22;3:e430. [Content Brief]

[2]. A Perelman, et al. JC-1: alternative excitation wavelengths facilitate mitochondrial membrane potential cytometry. Cell Death Dis. 2012 Nov 22;3:e430.  [Content Brief]
[3]. Vera C. Keil, et al. Ratiometric high-resolution imaging of JC-1 fluorescence reveals the subcellular heterogeneity of astrocytic mitochondria. Pflügers Archiv - European Journal of Physiology. 2011,462(5): 693-708.  [Content Brief]
[4]. Jung-Ho LEE, et al. Real-time analysis of amyloid fibril formation of α-synuclein using a fibrillation-state-specific fluorescent probe of JC-1. Biochem. J. 2009, 418:311-323.
[5]. Salvioli S, et al. JC-1, but not DiOC6(3) or rhodamine 123, is a reliable fluorescent probe to assess delta psi changes in intact cells: implications for studies on mitochondrial functionality during apoptosis. FEBS Lett. 1997 Jul 7;411(1):77-82.  [Content Brief]

注：產(chǎn)品僅用于科研