超聲波細胞破碎儀(粉碎機):是一種利用強超聲在液體中產(chǎn)生空化效應(yīng),對物質(zhì)進行超聲處理的多功能、多用途的儀器,能用于多種動植物細胞、病毒細胞的破碎,同時可用來乳化、分離、勻化、提取、消泡、清洗及加速化學反應(yīng)等等。被廣泛應(yīng)用于生物化學、微生物學、藥物化學、表面化學、物理學、動物學等領(lǐng)域。
本儀器功能全,外觀美,性能可靠。儀器采用大屏幕顯示,微機集中控制,超聲時間,功率任意設(shè)定,樣品溫度檢測顯示、頻率微機跟蹤、故障自動報警,所有功能都顯示在液晶大屏幕中。
名稱:S-JY98-IIIDN帶溫控超聲波細胞破碎儀(20-1200W) 型號:S-JY98-IIIDN
■ 用于動植物細胞、細菌、芽孢或組織的粉碎,從細胞中提取蛋白質(zhì)以及進行病毒、疫苗的科學培養(yǎng)實驗。
■ 加速化學、物理學等的反應(yīng)速度和加速液體脫氣。
■ 原油稀釋、油水乳化、加速脫晶,玻璃均漿等進行的科研分析。
■ 分散稀土,各類無機礦物質(zhì),以及配制近納米百分之一的乳膠體均化混合物等。
■ 模具微孔,盲孔的快速強力高精洗液。
實驗目的
1、了解超聲細胞破碎的基本原理
2、掌握超聲細胞破碎的基本技術(shù)
實驗原理
強聲波作用溶液時,氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。
材料和試劑
細菌10ml、燒杯、刨冰、75%酒精棉球。
探頭型號大小 破碎細胞容量
2mm | 150ul-5ml |
3mm | 200ul-10ml |
6mm | 10ml-50ml |
10mm | 100ml-200ml |
15mm | 200ml-500ml |
20mm | 500ml-1000ml |
25mm | 500ml-1200ml |
■ 功率:20-1200W(1%-99%)可調(diào);
■ 破碎容量:10-1000ML(可定制1-1000ML);
■ 溫控范圍:室溫-90度(可選配低溫恒溫);
■ 隨機變幅桿:Φ20功率:20-1200W(1%-99%)可調(diào);
型號 | S-JY98-IIIDN |
顯示方式 | 液晶顯示 |
單次超聲時間 | 0.1-9.9S |
單次間隙時間 | 0.1-9.9S |
總工作時間 | 1-999M |
頻率 | 19.5-20.5KHz |
功率 | 20-1200W(1%-99%)可調(diào) |
破碎容量 | 50-1000ML(可定制1-1000ML) |
溫控范圍 | 室溫-90度(可選配低溫恒溫) |
報警功能有 | 溫度、時間、過載、空載 |
隨機變幅桿 | Φ20 |
可選配變幅桿 | Φ10、15、22 |
占空比 | 0.1-99.9% |
電源 | 220V±5%/ 50Hz(可定制110V) |
電源箱+換能器重量 | 18kg |
電源機箱尺寸及凈重 | 42×28×22(CM);16kg |
用PWM控制開關(guān)電源,功率連續(xù)可調(diào),穩(wěn)定性好,可貯存50組實驗參數(shù)。 | |
特點 | |
隨機變幅桿 | Φ20 |
可選配變幅桿 | Φ10、15、22 |
細胞破碎的方法:
一、機械破碎法:是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器 等將細胞破碎開來 。
1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至最慢處,開動開關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。
2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。
二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎開來。
1:用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動力破碎細胞壁和細胞器)。
機制:可能與強聲波作用溶液時,氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時間、細胞濃度和細胞類型等。(使用時注意降溫,防止過熱)。
2. 高壓破碎:細胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上,被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過程中細胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內(nèi)含物。
這是一種溫和的、破碎細胞的較理想的方法。
3. 反復凍融法:將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內(nèi)冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結(jié)構(gòu)破碎。
三、化學破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜,使細胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變 。
有些動物細胞,例如腫瘤細胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。
四、酶學破碎法 :選用合適的酶,使細胞壁遭到破壞,進而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開來。
細菌細胞壁較厚,可采用處理效果更好。
裂解液標準配方: 50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml。(在這個pH范圍內(nèi)比較好發(fā)揮作用) 。
綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質(zhì)量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應(yīng)該在破碎的同時多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。
使用前注意事項:
1.根據(jù)所處理的樣本體積選擇適當探頭,使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭,換探頭須剛專用扳手更換;
2.AMPLITUDE旋鈕打開時,探頭不得在空氣中暴露,特殊情況下(測試探頭)不應(yīng)超過10秒;
3.使用前準備好冰盒,樣品處理時必須置于冰浴中,樣品濃度不可過大。