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人載脂蛋白A5檢測(cè)試劑盒（ELISA）Human ApoA5 Assay Kit - IBL

產(chǎn)品規(guī)格

96T

產(chǎn)品預(yù)期用途

本產(chǎn)品僅供科研用，不用于臨床診斷。

檢測(cè)原理

該載脂蛋白A5檢測(cè)試劑盒是固相夾心ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定）。當(dāng)將第一抗體包被在平板上時(shí)，將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入到板孔中進(jìn)行第一次反應(yīng)。 反應(yīng)后，加入HRP-綴合的二抗進(jìn)入板孔進(jìn)行第二次反應(yīng)。 沖洗掉未結(jié)合的二抗后，將四甲基聯(lián)苯胺（TMB）加入孔中并顯色。

檢測(cè)樣本

人血清和EDTA-血漿

儲(chǔ)存條件

2-8℃保存，有效期見(jiàn)試劑盒外包裝

試劑盒成分

1  預(yù)包被板:  抗人ApoA5（53A2）鼠單克隆抗體               96T x 1

2  酶標(biāo)記抗體:

  (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗人ApoA5(63A2)  小鼠IgG Fab’）     0.4mL x 1

3  標(biāo)準(zhǔn)品:             重組人ApoA5                       0.5mL x 2      

4  EIA緩沖液:                                             30mL x 1

5  標(biāo)記抗體稀釋液:                                         12mL x 1

6  顯色劑:   15mL x 1

7  終止液:   12mL x 1

8  濃縮洗滌液:                                             50mL x 1

實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供)

 酶標(biāo)儀                微移液管及其槍頭

 量筒及燒杯             去離子水

 冰箱(4°C)               坐標(biāo)紙(log/log)

 吸水紙                 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋)

 洗瓶 (用于洗板)         孵育器（37±1℃）

 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)

操作注意事項(xiàng)：

1) 收集后應(yīng)盡快測(cè)定樣品。對(duì)于樣品的儲(chǔ)存，凍存并避免反復(fù)凍融。在低溫下解凍測(cè)試樣品，并在測(cè)量前將其混合。

2) 樣本應(yīng)用本試劑盒中所含的“4，EIA緩沖液"稀釋。

3) 建議對(duì)測(cè)試樣品和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行重復(fù)測(cè)量。

4) 每個(gè)測(cè)定應(yīng)運(yùn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線。

5) 在中性pH范圍內(nèi)使用測(cè)試樣品。有機(jī)溶劑的污染可能影響測(cè)量。

6) 使用前，將所有試劑置于室溫（R.T.）并在使用前輕輕混合?；旌虾?，確保試劑質(zhì)量無(wú)變化。

7) 僅使用本試劑盒中包含的“8，濃縮洗滌緩沖液"，進(jìn)行洗板。洗滌不足可能導(dǎo)致測(cè)量失敗。

8) 推薦使用洗板機(jī)（等待時(shí)間為零秒）。每次反應(yīng)后立即用洗板機(jī)清洗酶標(biāo)板。如果你使用洗滌瓶子代替洗板機(jī)，在每個(gè)板孔中填充洗滌緩沖液后，立即將板倒置并搖動(dòng)，以清除洗滌緩沖液。按照測(cè)量程序第3節(jié)中描述的測(cè)量次數(shù)進(jìn)行洗滌。應(yīng)洗滌的要求進(jìn)行，以避免任何不充分的洗滌。

9) 每個(gè)洗板程序的最后一次洗板后，將酶標(biāo)板在吸水紙上拍干，以清除任何殘留的洗滌液。

10) “6，Chromogen-TMB溶液"應(yīng)由于其對(duì)光敏感性而在黑暗中儲(chǔ)存。也應(yīng)避免與金屬接觸。每次使用應(yīng)根據(jù)所需要的量取出到收集容器內(nèi)備用。

11) 將TMB溶液加入孔中后，液體逐漸變?yōu)樗{(lán)色。在這個(gè)過(guò)程中，反應(yīng)板應(yīng)置于黑暗中。收集容器中剩余的TMB的溶液不能返回原來(lái)的瓶子，以避免污染。

12) 應(yīng)在加入“7，終止液" 30分鐘內(nèi)完成O.D. 測(cè)量。

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