Thermo Scientific 活化 Cdc42 沉降和檢測試劑盒是一種全套試劑盒，能夠通過與 Pak1 蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域的特異性蛋白相互作用選擇性地富集和檢測 GTP 結(jié)合 Cdc42 GTPase。
活化 Cdc42 沉降和檢測試劑盒包含純化的 GST-Pak1 蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域 (PBD)、瓊脂糖樹脂、陽性和陰性對照品（分別為 GTPγS 和 GDP）、裂解/結(jié)合/洗滌緩沖液、抗 Cdc42 一抗、樣品緩沖液、離心柱和收集管。該試劑盒使用 NIH 3T3 細(xì)胞的裂解物進(jìn)行驗(yàn)證，已知該細(xì)胞系具有穩(wěn)健的 Cdc42 活性。
活化 Cdc42 沉降和檢測試劑盒的特點(diǎn)：
?高靈敏度和精確度—優(yōu)化試劑、特異性抗 Cdc42 抗體和 Western 印跡程序可確保精確控制和半定量結(jié)果
?經(jīng)驗(yàn)證—對 Cdc42 檢測進(jìn)行功能檢測，以確保質(zhì)量和性能
?兼容—對小鼠、大鼠和人來源的多種細(xì)胞類型有效
應(yīng)用：
? 追蹤細(xì)胞分化、遷移、分裂和細(xì)胞骨架重排期間的 Cdc42 GTPase 活化
? 研究絲狀偽足形成期間 Cdc42 的活化
? 監(jiān)測使用生長因子刺激后的 Cdc42 活性
? 篩查小分子抑制劑對 Cdc42 活性的影響
使用經(jīng)用于活化內(nèi)源性 Cdc42 的 GTPγS 處理的細(xì)胞裂解物相對于經(jīng)滅活小 GTPase 的 GDP 處理的裂解物，驗(yàn)證了活化 Cdc42 沉降和檢測試劑盒的活化 Cdc42 富集方法的功能和特異性。GTPγS 處理捕獲 GTP 結(jié)合活化形式的 Cdc42，在存在內(nèi)源性 Cdc42 時產(chǎn)生強(qiáng)烈信號。GDP 處理使 Cdc42 進(jìn)入 GDP 結(jié)合的非活化狀態(tài)，無論 Cdc42 蛋白水平如何均幾乎不產(chǎn)生信號。對該試劑盒進(jìn)行了優(yōu)化，用于使用 HRP 結(jié)合型二抗（山羊抗小鼠 IgG，產(chǎn)品編號 31430）和 Thermo Scientific SuperSignal West Pico 化學(xué)發(fā)光底物（產(chǎn)品編號 34080）進(jìn)行 Western 印跡檢測。試劑盒所含成分均足夠進(jìn)行 30 次沉降實(shí)驗(yàn)。
Cdc42 背景：
Rho 家族 GTPase 具有許多細(xì)胞功能，包括細(xì)胞信號傳導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和肌動蛋白細(xì)胞骨架的組織。該 GTPase 家族包括 Rho（RhoA、RhoB 和 RhoC）、Rac（Rac1、Rac2、Rac3 和 RhoG）、Cdc42（Cdc42 和 G25K）、Rnd（Rnd1、Rnd2 和 RhoE/Rnd3）、RhoBTB 家族和 Miro 家族。這些 GTPase 通過 GPCR、激酶、細(xì)胞因子和黏附受體實(shí)現(xiàn)從質(zhì)膜到細(xì)胞溶質(zhì)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。通過蛋白羧基末端的香葉酰香葉酰脂質(zhì)修飾來實(shí)現(xiàn)與質(zhì)膜的黏附。Cdc42 活化導(dǎo)致肌動蛋白微絲聚合和絲狀偽足形成。
RhoGTPase 的 Cdc42 亞族與 Rho 和 Rac 家族相比未得到充分表征。Cdc42 和 Rac1 均通過受體激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)活化，導(dǎo)致 SAPK 和 p38 應(yīng)激激酶通路激活。中性粒細(xì)胞中的化學(xué)引誘物 fMLP 也激活 Cdc42。纖連蛋白激活 Cdc42 和 Rac1 以誘導(dǎo)細(xì)胞伸展，用 TNF-α 和 IL-1 刺激可導(dǎo)致肌動蛋白細(xì)胞骨架發(fā)生變化。Cdc42 和 Rac1 之間存在顯著的交叉串?dāng)_，因?yàn)樗鼈冊谥丿B的通路中起作用，在某些情況下，Cdc42 可能在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中在 Rac1 上游起作用。Cdc42 的某些主效應(yīng)蛋白為 Pak1、N-WASP 和 IQGAP。Pak1 是一種參與 SAPK 應(yīng)激通路中 JNK 活化的激酶。N-WASP 是誘導(dǎo)絲狀偽足形成的效應(yīng)子，IQGAP 與 F-肌動蛋白微絲相互作用。在神經(jīng)元分化中，Cdc42 在神經(jīng)突增生中起積極作用。然而，GTPase 的 Rho 家族可在細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)期間發(fā)揮激動作用以及在分化期間發(fā)揮拮抗作用。
更多產(chǎn)品數(shù)據(jù)
?通過特異性下游效應(yīng)子測定小 GTPase 的激活
活化 Cdc42 沉降和檢測試劑盒包含純化的 GST-Pak1 蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域 (PBD)、瓊脂糖樹脂、陽性和陰性對照品（分別為 GTPγS 和 GDP）、裂解/結(jié)合/洗滌緩沖液、抗 Cdc42 一抗、樣品緩沖液、離心柱和收集管。該試劑盒使用 NIH 3T3 細(xì)胞的裂解物進(jìn)行驗(yàn)證，已知該細(xì)胞系具有穩(wěn)健的 Cdc42 活性。
活化 Cdc42 沉降和檢測試劑盒的特點(diǎn)：
?高靈敏度和精確度—優(yōu)化試劑、特異性抗 Cdc42 抗體和 Western 印跡程序可確保精確控制和半定量結(jié)果
?經(jīng)驗(yàn)證—對 Cdc42 檢測進(jìn)行功能檢測，以確保質(zhì)量和性能
?兼容—對小鼠、大鼠和人來源的多種細(xì)胞類型有效
應(yīng)用：
? 追蹤細(xì)胞分化、遷移、分裂和細(xì)胞骨架重排期間的 Cdc42 GTPase 活化
? 研究絲狀偽足形成期間 Cdc42 的活化
? 監(jiān)測使用生長因子刺激后的 Cdc42 活性
? 篩查小分子抑制劑對 Cdc42 活性的影響
使用經(jīng)用于活化內(nèi)源性 Cdc42 的 GTPγS 處理的細(xì)胞裂解物相對于經(jīng)滅活小 GTPase 的 GDP 處理的裂解物，驗(yàn)證了活化 Cdc42 沉降和檢測試劑盒的活化 Cdc42 富集方法的功能和特異性。GTPγS 處理捕獲 GTP 結(jié)合活化形式的 Cdc42，在存在內(nèi)源性 Cdc42 時產(chǎn)生強(qiáng)烈信號。GDP 處理使 Cdc42 進(jìn)入 GDP 結(jié)合的非活化狀態(tài)，無論 Cdc42 蛋白水平如何均幾乎不產(chǎn)生信號。對該試劑盒進(jìn)行了優(yōu)化，用于使用 HRP 結(jié)合型二抗（山羊抗小鼠 IgG，產(chǎn)品編號 31430）和 Thermo Scientific SuperSignal West Pico 化學(xué)發(fā)光底物（產(chǎn)品編號 34080）進(jìn)行 Western 印跡檢測。試劑盒所含成分均足夠進(jìn)行 30 次沉降實(shí)驗(yàn)。
Cdc42 背景：
Rho 家族 GTPase 具有許多細(xì)胞功能，包括細(xì)胞信號傳導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和肌動蛋白細(xì)胞骨架的組織。該 GTPase 家族包括 Rho（RhoA、RhoB 和 RhoC）、Rac（Rac1、Rac2、Rac3 和 RhoG）、Cdc42（Cdc42 和 G25K）、Rnd（Rnd1、Rnd2 和 RhoE/Rnd3）、RhoBTB 家族和 Miro 家族。這些 GTPase 通過 GPCR、激酶、細(xì)胞因子和黏附受體實(shí)現(xiàn)從質(zhì)膜到細(xì)胞溶質(zhì)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。通過蛋白羧基末端的香葉酰香葉酰脂質(zhì)修飾來實(shí)現(xiàn)與質(zhì)膜的黏附。Cdc42 活化導(dǎo)致肌動蛋白微絲聚合和絲狀偽足形成。
RhoGTPase 的 Cdc42 亞族與 Rho 和 Rac 家族相比未得到充分表征。Cdc42 和 Rac1 均通過受體激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)活化，導(dǎo)致 SAPK 和 p38 應(yīng)激激酶通路激活。中性粒細(xì)胞中的化學(xué)引誘物 fMLP 也激活 Cdc42。纖連蛋白激活 Cdc42 和 Rac1 以誘導(dǎo)細(xì)胞伸展，用 TNF-α 和 IL-1 刺激可導(dǎo)致肌動蛋白細(xì)胞骨架發(fā)生變化。Cdc42 和 Rac1 之間存在顯著的交叉串?dāng)_，因?yàn)樗鼈冊谥丿B的通路中起作用，在某些情況下，Cdc42 可能在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中在 Rac1 上游起作用。Cdc42 的某些主效應(yīng)蛋白為 Pak1、N-WASP 和 IQGAP。Pak1 是一種參與 SAPK 應(yīng)激通路中 JNK 活化的激酶。N-WASP 是誘導(dǎo)絲狀偽足形成的效應(yīng)子，IQGAP 與 F-肌動蛋白微絲相互作用。在神經(jīng)元分化中，Cdc42 在神經(jīng)突增生中起積極作用。然而，GTPase 的 Rho 家族可在細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)期間發(fā)揮激動作用以及在分化期間發(fā)揮拮抗作用。
更多產(chǎn)品數(shù)據(jù)
?通過特異性下游效應(yīng)子測定小 GTPase 的激活
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
采購中心
