Pierce™ 化重組蛋白 G

在蛋白免疫印跡、ELISA、IHC 和其他免疫檢測方案中使用 Thermo Scientific Pierce 化重組蛋白 G 探查和檢測小鼠和人抗體（特別是 IgG 同種型）。

重組蛋白 G 的特點：

•每個蛋白含有兩個 Fc 結合結構域
• 對于小鼠（包括 IgG1）、人（包括 IgG3）和大鼠、山羊和?？贵w，優(yōu)于蛋白 A
• 對于豚鼠、豬、狗和貓，弱于蛋白 A
• 不結合人 IgM、IgD 或 IgA

蛋白質 G 是一種從 G 群鏈球菌中分離得到的細菌細胞壁蛋白。天然蛋白 G 的 DNA 測序可鑒定兩個 IgG 結合結構域以及白蛋白和細胞表面結合位點。白蛋白和細胞表面結合結構域已從重組蛋白 G 中消除以減少非特異性結合，因此，可用于從粗樣品中分離 IgG。理想結合發(fā)生在 pH 5條件下，盡管在 pH 7.0 - 7.2條件下結合也有效。

重組蛋白 G 的性質：
• 來源：大腸桿菌
• 分子量：～21,600（使用 SDS-PAGE 測量的表觀 MW：32,000）
•形式：無鹽粉末
• 0.1% 溶液的 A280：1.0
• 等電點 (pI)：4.5

由于對于大多數(shù)哺乳動物 IgG，蛋白 G 比蛋白 A 具有更高親和力，它可用于純化不能與蛋白 A 很好結合哺乳動物 IgG。蛋白 G 與多個 IgG 亞型（如人 IgG3、小鼠 IgG1 和大鼠 IgG2a）結合的容量明顯高于蛋白 A。但是，蛋白 G 不與人 IgM、IgD 和 IgA 結合。蛋白 A 和蛋白 G 之間的結合特性差異可通過各個蛋白的 IgG 結合位點的不同成分加以解釋。這些蛋白的三級結構非常相似，盡管它們的氨基酸成分顯著不同。

報告的 IgG 與蛋白質 G 的結合特性存在不一致。蛋白 G 的分離和生產方法差異可能影響 IgG 結合，部分原因是在不同來源的蛋白 G 上存在不同數(shù)量的 IgG 結合位點。已使用天然蛋白 G 和多種不同的重組形式進行了結合研究。已使用幾種測定方法來確定相對親和力，包括放射標記實驗和 ELISA 技術。親和測定的不同或許可以解釋部分的不一致。此外，使用不同的緩沖液時，會有明顯的結合差異。與20 mM Tris 緩沖液 (pH 7.5) 相比，當使用蛋白 G 結合緩沖液時，與蛋白 G 結合的大鼠血清 IgG 約增加 44%。

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