1、試劑配制及保存
緩沖劑 6包 每包加510mL蒸餾水或純凈水溶解,常溫存放。
顯色劑 3瓶 每瓶加10.5mL緩沖液溶解，4℃冰箱保存，每份加100μL。
底 物 10瓶 每瓶加3.1mL蒸餾水或純凈水溶解，4℃冰箱保存，每份加100μL。
酯酶 10瓶 不用配制，直接取用 4℃冰箱保存，每份加100μL。
酶活力 空白對(duì)照1分鐘吸光度變化值(ΔΑ0)在0.15-0.3之間。
2、樣品提取
取2g果蔬樣品（塊莖類取4g）剪成1cm左右見方碎片，放入小燒杯（或取樣瓶）中；加入10mL緩沖液，振蕩1～2min，倒出提取液，靜置2min待測(cè)。
3、測(cè)試
對(duì)照測(cè)試：于專用反應(yīng)瓶中加入2.5mL緩沖液，再分別加入100μL顯色劑和酶液，混勻，37℃下放置15min后加入100μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測(cè)試通道，按儀器“對(duì)照”鍵測(cè)試3min的吸光度變值ΔΑ0。
樣品測(cè)試：于專用反應(yīng)瓶中加入2.5mL待測(cè)樣品液，再分別加入100μL顯色劑和酶液，混勻，37℃下放置15min后加入100μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測(cè)試通道，按儀器“樣品”鍵，測(cè)試3min的吸光度變化值ΔΑt。
結(jié)果判定：
◇ 以分光光度計(jì)測(cè)試時(shí)，按以下表達(dá)式計(jì)算出抑制率： 抑制率(%)=[(ΔΑ0－ΔΑt)/ΔΑ0]×100
◇ 以農(nóng)殘檢測(cè)儀檢測(cè)時(shí)其抑制率一般可自動(dòng)計(jì)算。若樣品抑制率≥50%，表示被測(cè)果蔬農(nóng)殘超標(biāo)，為陽性結(jié)果。陽性結(jié)果的樣品需做2次以上重復(fù)檢測(cè)，多次檢測(cè)仍呈陽性需用氣相色譜等儀器做進(jìn)一步確認(rèn)。
操作提示：
在加底物的環(huán)節(jié)中，可預(yù)先將底物加入比色杯，待靜置時(shí)間一到，馬上將反應(yīng)瓶中的反應(yīng)液倒入已經(jīng)加有底物的比色杯，并迅速放入測(cè)試通道進(jìn)行測(cè)試。這樣可以減少同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品時(shí)因加底物時(shí)間過長而造成的誤差。
4、注意事項(xiàng)
酶活性要求：本試劑盒中酶試劑正?；钚驭う?≥0.3，符合GB/T 5009.199-2003方法的要求。
保存：試劑盒應(yīng)保存4℃冰箱，保質(zhì)期12個(gè)月。
使用：任何試劑使用時(shí)，用一瓶打開一瓶，用完后才使用新的，防止變質(zhì)。
器具專用原則：任何用于移液的器具和容器都應(yīng)各自貼上標(biāo)簽，單獨(dú)使用，以免交叉污染。
試劑只出不入原則：測(cè)試時(shí)，從任何試劑瓶吸出的試劑，禁止再次注射回試劑瓶。
環(huán)境溫度對(duì)測(cè)試的影響：當(dāng)環(huán)境溫度過低時(shí)（一般低于20℃）,測(cè)試時(shí)需作必要保溫措施。
常溫方法：本試劑可用常溫方法測(cè)試，測(cè)試時(shí)試劑室溫放置10min，測(cè)試1min的吸光度變化值ΔΑ0。正?；钚驭う?在0.15~0.3之間。
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