運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Eikenella corrodensPCR |
貨號 | YZP3569 |
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
以下是嚙蝕艾肯菌PCR檢測試劑盒多少錢的相關產(chǎn)品:
八角麻 英文名稱:Octagonal Ma 規(guī)格::1g 保存::-20℃,避光
藤黃 英文名稱:Gamboge 規(guī)格::2g 保存::-20℃,避光
槐角 英文名稱:Fructus Sophorae 規(guī)格::0.1g 保存::-20℃,避光
矮地茶 英文名稱:Ardisia japonica 規(guī)格::0.5g 保存::-20℃,避光
番石榴葉 英文名稱:Guava leaf 規(guī)格::1g 保存::-20℃,避光
皂角刺 英文名稱:Gleditsia sinensis 規(guī)格::0.5g 保存::-20℃,避光
牛大力(美麗崖豆藤) 英文名稱:Millettia speciosa (Millettia speciosa Champ.) 規(guī)格::1g 保存::-20℃,避光
烏梅 英文名稱:Dark plum 規(guī)格::2g 保存::-20℃,避光
水翁花 英文名稱:Shui Wenghua 規(guī)格::2g 保存::-20℃,避光
雪蓮花(天山雪蓮花) 英文名稱:Saussurea involucrata (Tianshan snow lotus) 規(guī)格::1g 保存::-20℃,避光
毛訶子 英文名稱:Mao Hezi 規(guī)格::0.5g 保存::-20℃,避光
細辛(北細辛) 英文名稱:Xixin (Asarum) 規(guī)格::1g 保存::-20℃,避光
昆明山海棠 英文名稱:Kunming Begonia 規(guī)格::0.5g 保存::-20℃,避光
杜仲 英文名稱:Eucommia ulmoides Oliv 規(guī)格::2g 保存::-20℃,避光
嚙蝕艾肯菌PCR檢測試劑盒多少錢人組織蛋白去乙酰化酶HD(Human Histone Deacetylase) ELISA Kit 96T
人甲基化酶Human Methylase ELISA Kit 96T
人抗酒石酸酸性磷酸酶5bTRACP-5b9Human tartrate-resistant acid phosphatase 5b) ELISA Kit 96T
人磷酸肌醇3激酶PI3K(Human Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit 96T
人蛋白激酶BPKB(Human protein kinase B) ELISA Kit 96T
人丙酮酸激酶M2型同工酶M2-PK (Human Pyruvate Kinase) ELISA Kit 96T
人血紅素氧合酶2HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit 96T
人甲狀腺過氧化物酶TPO(Human Thyroid-Peroxidase) ELISA Kit 96T
人αL巖藻糖苷酶AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 96T
人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶eNOS(Human Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 96T
人血紅素氧合酶1HO-1(Human heme oxygenase 1) ELISA Kit 96T
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。