上海樊克生物專業(yè)經(jīng)營進口/國產(chǎn)ELISA試劑盒,為您提供了人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒操作說明書 ,價格,品牌,用途,特點等資訊,本司提供免費代測服務(wù),憑借多年的行業(yè)經(jīng)驗,高質(zhì)量產(chǎn)品,完善售后服務(wù),合理價格贏得了客戶的*好評,本司已和國內(nèi)多所科研院,生物公司,醫(yī)院,高校等達成了*合作關(guān)系,所經(jīng)營的ELISA試劑盒種屬涵蓋了科研實驗所需的動植物,咨詢!
中文名:人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒
別名:人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA Kit
貨號:fk-0001
供應(yīng)商:上海樊克
規(guī)格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個月
樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
檢測方法:酶聯(lián)免疫吸附法
研究領(lǐng)域:炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、信號通路、免疫學(xué)、其他研究。
供應(yīng)貨期:現(xiàn)貨供應(yīng)
特點:敏感性高、特異性強、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
ELISA試劑盒的儲存及有效期:
1. 未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。
2. 使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
注意:
試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在*實驗后1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
實驗準(zhǔn)備:
1. ELISA試劑盒及待測樣本
2. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
3. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭
4. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
5. 吸水紙
人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒操作說明書標(biāo)本要求:
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3. 尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5. 培養(yǎng)細(xì)胞:
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6. 組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融 .
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%。
檢測范圍:
0.2IU/L - 6IU/L
人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒操作說明書操作步驟:
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,依次進行稀釋數(shù)倍。
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA檢測試劑盒注意事項:
1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。