泛素蛋白（Ub）檢測(cè)試劑盒（血清.血漿.組織）

泛素蛋白（Ub）檢測(cè)試劑盒（血清.血漿.組織）齊一生物專(zhuān)業(yè)經(jīng)營(yíng)銷(xiāo)售通用試劑,分析試劑,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),合成試劑,中間體,催化劑,生化試劑等化學(xué)產(chǎn)品，我們致力于以專(zhuān)業(yè)化的視角，提供豐富專(zhuān)業(yè)產(chǎn)品資料及其相關(guān)技術(shù)開(kāi)發(fā)資訊，產(chǎn)品內(nèi)容覆蓋分析化學(xué),無(wú)機(jī)化學(xué),有機(jī)化學(xué),生命科學(xué),材料科學(xué)等領(lǐng)域.已迅速發(fā)展成為國(guó)內(nèi)科學(xué)試劑的運(yùn)營(yíng)商之一，是國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室供應(yīng)商，并與國(guó)內(nèi)多家科研單位緊密合作.齊一生物科技客服

泛素蛋白（Ub）檢測(cè)試劑盒（血清.血漿.組織）標(biāo)本要求： 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn).若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性.
操作步驟：
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉.（稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200 ng/L,800 ng/L ,400 ng/L,200ng/L, 100 ng/L）.
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔.在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）.加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻.
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘.
4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用.
5.洗滌：小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干.
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外.
7.溫育：操作同3.
8.洗滌：操作同5.
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
10.終止：每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）.
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）. 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行.
注意事項(xiàng)：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存.
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果.
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差.一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排搶加樣.
4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),做復(fù)孔.如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值）,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）.
5．封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染.
6．底物請(qǐng)避光保存.
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理.
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用.
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn).

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